酶基因

摘要： 喜树(Camptotheca acuminata)能够合成具有抗肿瘤作用的喜树碱(CPT)与10-羟喜树碱(10-HCPT),其积累具有组织特异性,但对于同一组织不同发育阶段的积累特性尚不清楚。利用高效液相色谱和实时荧光定量PCR分析喜树幼叶不同部位(叶片、叶基、叶柄)CPT和10-HCPT积累量以及关键酶基因相对表达量。结果发现,幼叶中CPT的积累量在叶片中最多,其次是叶基、叶柄;10-HCPT的积累量在叶柄中最多,其次是叶基、叶片;合成途径关键酶基因CaG8O、CaCYC1、Ca7-DLS、Ca7-DLGT、CaTDC 1以及CaSTR的表达均具有相似的趋势,且与CPT的积累量呈负相关,但与10-HCPT的积累量呈正相关。

摘要： 香气是梨果实的一个重要品质特征.经研究证明梨果实香气成分主要是醛、醇和酯等次生代谢物,这些挥发性化合物的生物代谢主要有脂肪酸路径、氨基酸路径、糖类(单糖)三条路径,涉及关键酶主要有脂氧合酶、醇脱氢酶和醇酰基转移酶等.从1927年研究梨的香气成分开始,至今已经深入到基因层面,为下一步精准调控梨果实的香气品质和品种改良提供重要的理论基础.

摘要： 研究以‘猩红色’万寿菊和‘非洲’万寿菊为试验材料,利用Real-time荧光定量PCR技术研究类胡萝卜素降解代谢途径中CCD1,CCD4b,CCD7和NCED2在不同品种及不同器官中的表达情况.结果表明:CCD1,CCD4b,CCD7和NCED2在不同万寿菊品种根、茎、叶、花中均有不同程度的表达,4个基因在花中的表达均为‘非洲’万寿菊高于‘猩红色’万寿菊(P＜0.01),表明上述基因可能与不同万寿菊花色差异的形成有密切关系.

摘要： 黄连为我国传统中药材,临床应用已有上千年的历史.其中,黄连的主要药效成分为小檗碱等苄基异喹啉类生物碱(BIAs).但面对中药资源日渐匮乏,无法满足临床需求这一问题,亟需解决.目前,新兴的合成生物学在对天然产物合成中呈现出良好的应用前景,特别是对结构复杂的BIAs的合成.该文综述了近年来黄连中BIAs的生源途径及合成生物学在BIAs合成中的应用进展,希望从生物层面对BIAs的合成有更加全面的了解,对以后通过合成生物学的手段获取小檗碱等BIAs具有一定的指导意义.

摘要： 2018年10月11日,《ThePlantJournal》在线发表了华中农业大学马铃薯团队题为＂转录组与代谢组分析揭示腐胺代谢途径精氨酸脱羧酶基因ADC1对马铃薯驯化耐寒的重要作用＂的研究论文,进一步揭示了马铃薯抗寒的分子机制。

摘要： 我所主办的英文期刊Journal of Cotton Research（《棉花研究》）第1期的4篇文章已经在线发表。李付广主编宣布JCR创刊,并简要介绍本期发表的4篇文章。Qanmber Ghulam等在陆地棉、亚洲棉和雷蒙德氏棉中分别克隆了140、80和89个含RING-H2结构的E3连接酶基因。结果表明：陆地棉的RING-H2结构的E3连接酶基因与纤维发育密切相关.

摘要： 为研究西瓜果实发育过程番茄红素含量变化与相关酶基因表达关系,以LSW-177(红瓤)和COS(浅黄瓤)为材料,通过高效液相色谱法(HPLC)测定从坐果到过熟7个不同时间点果肉组织番茄红素变化,利用荧光定量PCR测定相应时期相关酶基因表达量变化.结果表明,LSW-177(红瓤)授粉后16d,番茄红素开始逐渐积累,果实转色期(授粉后24 d)番茄红素迅速积累,成熟期(授粉后40 d)达到峰值,随后下降.而COS(浅黄瓤)整个发育过程均未检测到番茄红素积累.四种相关酶基因表达量两品种间存在差异.番茄红素积累与Psy1基因表达呈显著正相关,与Lcyb基因表达呈显著负相关.结合Psy1和Lcyb基因两品种间表达差异,特别是果肉转色期差异分析,推测Psy1和Lcyb基因是西瓜形成番茄红素关键基因.通过基因序列分析,浅黄瓤西瓜中Psy1基因内含子有缺失;两品种Lycb基因间有3个SNP位点,存在两个蛋白差异.

摘要： 微藻以其生长周期短、不占用农业耕地而被作为第三代生物柴油的首选原料.产油率不高一直是制约微藻生物柴油发展的成本瓶颈.随着现代分子生物技术的发展,采用代谢过程、基因工程的方法,实现对微藻油脂代谢调节的人工控制,从而提高微藻油脂产率将成为微藻生物柴油的发展方向.对乙酰辅酶A羧化酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、脂肪酸合成酶、酰基CoA:二酰基甘油酰基转移酶、苹果酸酶、柠檬酸裂合酶、柠檬酸合成酶等产油微藻代谢与调控关键酶基因进行了综述.总结了提高微藻产油率的发展思路,即通过基因工程手段实现对相关酶基因调控,以提高藻油的产率、降低生物柴油的生产成本,从而为工业化生产提供有力的技术手段.

摘要： 番茄红素是植物中含有的一种天然红色色素，人体从膳食中摄取番茄红素，对人体健康非常有益。目前番茄红素生物合成相关酶基因已经从很多植物中克隆出来，且已对关键酶基因进行了功能验证，为利用基因工程技术调控番茄红素合成途径提供研究基础。文章综述了植物番茄红素生物合成途径、相关酶基因及其在基因工程上应用的最新研究成果，并探讨了运用基因工程技术调控番茄红素合成的前景。

摘要： 茶树重要的次级代谢产物主要有多酚类物质、芳香类物质及茶氨酸等,这些次级代谢产物影响着茶叶色泽、香气、滋味等感官品质的形成.本研究通过荧光定量PCR分析了4个茶树品种中多酚类物质代谢和萜类香气物质代谢途径关键酶基因的表达差异,旨在研究茶树特征代谢物在不同茶树品种间的遗传关系.

摘要： 姜花是姜科多年生草本植物,其花朵盛开时可散发出诱人的芳香,主要成分为萜类物质.为了获得萜类物质生物合成的关键基因,利用RT-PCR结合RACE技术获得了两个萜类合成酶基因,分别编码593和591个氨基酸.原核表达和体外功能分析表明,重组HcTPS7的催化产物主要为桧烯,重组HcTPS8为双功能酶,其单萜产物为沉香醇,倍半萜产物为α-香柑油烯等13种物质.亚细胞定位试验表明,HcTPS7和HcTPS8均定位于质体.RT-qPCR分析表明,HcTPS7和HcTPS8基因主要在花瓣和萼片中表达,且受到花发育的调控,表达量变化分别和花中桧烯和沉香醇的释放规律相一致.本研究结果说明,HcTPS7和HcTPS8基因是调控姜花桧烯和沉香醇生物合成的重要基因,为进一步研究姜花香气形成机理和花香基因工程奠定了理论基础.

摘要： 人乳低聚糖具有抗病毒感染，增强免疫力，减少炎症等生理作用，对其合成的研究具有现实意义。岩藻低聚糖是人乳低聚糖的一种，可以在体外通过己糖激酶、磷酸甘露糖变位酶、GDP-甘露糖4,6脱水酶、α1,2-岩藻糖基转移酶等酶的作用下进行合成。rn 磷酸甘露糖变位酶(manB)是甘露糖合成人乳低聚糖代谢途径中的一个关键酶。因此，为大量获得磷酸甘露糖变位酶这个关键酶，采用PCR法从E.coli K12的基因组中扩增目的基因，并将其连接到原核表达载体Pet-22b(+)中，得到重组质粒Pet-manB，转化入大肠杆菌BL21(DE3)，构建基因工程菌BL21/Pet-manB重组基因工程菌。IPTG诱导诱导重组蛋白的表达，表达产物经Sds-PAGE进行分析。PCR和测序结果表明成功扩增出磷酸甘露糖变位酶基因，大小为1371bp，SDS-PAGE结果表明己糖激酶在大肠杆菌BL21中实现表达。

摘要： 应用单分子测序技术,获得蛹虫草子实体基因组300X数据.组装后获得14条contigs,最长为4.58 Mb,最小为0.35 Mb,N50为2.86 Mb.其中有4条是头尾带有末端端粒序列的完整染色体序列.另外8条在一端有这种特殊序列.确定和分析了14条contigs的所有甲基化位点及其Motifs,发现m6A甲基化模式主要为GA和GGAG形式.m4C主要为GC和CG/GC形式.为经过全长转录组测序共获得3 1 133条完整的cDNA序列.发现了非转录区的结构特征.阐析了蛹虫草中具有安眠作用的N6-(2-羟乙基)腺苷,和具有抗肿瘤活性的麦角甾醇的代谢通路以及相关酶基因在甲基化和转录水平上对代谢通路中酶的调控机制.

摘要： 对普洱茶发酵过程中微生物的研究、微生物胞外酶及与品质关系的研究进行综述.指出目前对普洱茶发酵过程中微生物及其酶系研究的不足,提出通过免培养的方法,采用分子生物学手段,在分子水平上对普洱茶发酵过程中微生物的多样性及酶基因进行研究的构想.

摘要： @@通过对根际低氧胁迫下黄瓜根系相关基因和蛋白的研究，有助于阐明钙在低氧逆境胁迫中的生理作用，为设施作物逆境调控和高效生产提供指导。

摘要： 极端微生物是一个巨大的潜在的优势基因资源库，未培养微生物研究是极端微生物研究的一个重要组成部分。未培养微生物在自然界土壤栖息群中占99%以上的资源。直接从极端环境土壤中抽提纯化宏基因组DNA构建文库是从分子生物学角度研究微生物基因资源的重要途径，这也是研究未培养微生物的生态、生理等特性的关键方法。本研究工作从碱性污染环境中采集土壤，直接提取纯化土壤宏基因组DNA，利用大肠杆菌作为宿主细胞构建质粒宏基因组文库。直接抽提和分离得粗制宏基因组DNA的产量为每克土壤样品10～30μg。

摘要： 海藻糖是植物在逆境胁迫条件下大量积累的一类物质,对生物度过干旱、高温、低温等逆境至关重要.大肠杆菌和酿酒酵母中的海藻糖合成均通过海藻糖-6-磷酸合酶和海藻糖-6-磷酸磷酸酯酶催化,相应的基因均已被克隆,将编码大肠杆菌的海藻糖-6-磷酸合酶和TPPA的otsA和otsB基因构建为一个嵌合基因otsAB,导入甜菜、马铃薯等中,转基因植株内海藻糖含量大大提高,植株的抗旱和耐寒性也大大提高,展现了海藻糖合成的酶基因在提高植物抗旱性方面应用的前景.研究发现拟楠芥菜等高等植物也可通过这两种酶的催化来合成海藻糖,目前已在拟楠芥菜、大麦、小麦、玉米等中发现了一些一海藻糖合成的酶基因具类似性的cDNA及EST序列,本研究通过对在不同植物中得到的海藻糖合成酶的cDNA序列及其推测的氨基酸序列的比较表明,在高等植物中也存在海藻糖合成的酶基因,尽管其核苷酸序列差异很大,其中都含有藻糖-6-磷酸合酶和TPPA的保守结构域,因而可以利用其保守区的氨基酸序列设计简并性引物来调取其中的编码藻糖-6-磷酸合酶和TPPA的基因,进一步用于作物抗旱、耐热、抗寒性的改良.

摘要： 本发明涉及新的根瘤菌GIN611KCTC11708BP或其细胞提取物，显示糖酵解活性的新氧化还原酶，编码所述氧化还原酶的基因，包括重组载体蛋白的重组菌株，或编码重组蛋白的表达载体，以及使用上述物质作为生物催化剂将天然产物糖酵解的方法。本发明还涉及一种使用上述物质从各种天然产物产生糖苷配基的方法。从本发明新的微生物分离的新氧化还原酶不属于葡糖苷酶类，但属于氧化还原酶类，并具有针对天然产物的糖酵解活性。新的氧化还原酶氧化天然产物糖苷配基中的糖，从而产生各种糖苷配基。

摘要： 本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶、该酶的基因、含有该基因的重组表达载体及重组工程菌及酶的制备方法，所述合成酶具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，可以由含有SEQIDNO:2所示的核苷酸序列的基因或该基因的突变体或者它们的互补序列表达而得。本发明合成酶MTSase具有较高的最适反应温度和热稳定性，具有较低的最适pH，降低了染菌风险，提高了生产的稳定性，显著提高了其和普鲁兰酶联合作用还原性淀粉水解物生产海藻糖的效率，显著提高了海藻糖生产效率。本发明得到表达酶的基因，可通过基因重组技术生产MTSase，酶表达量高，制备效率显著提高，成本显著降低，降低了海藻糖的生产成本。

摘要： 本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖水解酶、该酶的基因、含有该基因的重组表达载体及重组工程菌及酶的制备方法，所述水解酶具有如SEQIDNO:3所示的氨基酸序列，可以由含有SEQIDNO:4所示的核苷酸序列的基因或该基因的突变体或者它们的互补序列表达而得。本发明水解酶MTHase具有较高的最适反应温度和热稳定性，具有较低的最适pH，降低了染菌风险，提高了生产的稳定性，显著提高了其和普鲁兰酶联合作用还原性淀粉水解物生产海藻糖的效率。本发明得到表达酶的基因，可通过基因重组技术生产MTHase，酶表达量高，制备效率显著提高，成本显著降低，降低了海藻糖的生产成本。

摘要： 本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖合成酶、该酶的基因、含有该基因的重组表达载体及重组工程菌及酶的制备方法，所述合成酶具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列，可以由含有SEQIDNO:2所示的核苷酸序列的基因或该基因的突变体或者它们的互补序列表达而得。本发明合成酶MTSase具有较高的最适反应温度和热稳定性，具有较低的最适pH，降低了染菌风险，提高了生产的稳定性，显著提高了其和普鲁兰酶联合作用还原性淀粉水解物生产海藻糖的效率，显著提高了海藻糖生产效率。本发明得到表达酶的基因，可通过基因重组技术生产MTSase，酶表达量高，制备效率显著提高，成本显著降低，降低了海藻糖的生产成本。

摘要： 本发明公开了一种麦芽寡糖基海藻糖水解酶、该酶的基因、含有该基因的重组表达载体及重组工程菌及酶的制备方法，所述水解酶具有如SEQIDNO:3所示的氨基酸序列，可以由含有SEQIDNO:4所示的核苷酸序列的基因或该基因的突变体或者它们的互补序列表达而得。本发明水解酶MTHase具有较高的最适反应温度和热稳定性，具有较低的最适pH，降低了染菌风险，提高了生产的稳定性，显著提高了其和普鲁兰酶联合作用还原性淀粉水解物生产海藻糖的效率。本发明得到表达酶的基因，可通过基因重组技术生产MTHase，酶表达量高，制备效率显著提高，成本显著降低，降低了海藻糖的生产成本。

摘要： 本发明涉及新的根瘤菌GIN611KCTC11708BP或其细胞提取物，显示糖酵解活性的新氧化还原酶，编码所述氧化还原酶的基因，包括重组载体蛋白的重组菌株，或编码重组蛋白的表达载体，以及使用上述物质作为生物催化剂将天然产物糖酵解的方法。本发明还涉及一种使用上述物质从各种天然产物产生糖苷配基的方法。从本发明新的微生物分离的新氧化还原酶不属于葡糖苷酶类，但属于氧化还原酶类，并具有针对天然产物的糖酵解活性。新的氧化还原酶氧化天然产物糖苷配基中的糖，从而产生各种糖苷配基。

摘要： 本发明提供了一种3-甾酮-9α-羟基化酶基因及3-甾酮-9α-羟基化酶还原酶基因，通过构建各种表达载体并转化相关菌株，从而获得多种高表达菌株，包括大肠杆菌、链霉菌和分枝杆菌，还可构建无3-甾酮-9α-羟基化酶活性的分枝杆菌，上述构建的高表达菌株或其粗酶液可以用于催化生产3-甾酮-9-α羟基化甾体化合物，上述无3-甾酮-9α-羟基化酶活性的分枝杆菌可以用于降解甾醇制备雄甾-4-烯-3，17-二酮或雄甾-1，4-二烯-3，17-二酮，上述这些工程菌株可以大大提高甾体药物的生产效率与产品品质，有助于降低甾体药物生产过程中的能耗、提高药物前体的利用率、简化生产步骤，降低生产成本，且反应条件温和、环境友好，适合于大力推广应用，具有较高的经济效益和社会效益。

摘要： 本发明的目的是抑制显示对将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分作用的催泪成分合成酶基因的表达，提供了以该催泪成分合成酶基因的序列为基础设计的DNA和RNA、将催泪成分合成酶基因的表达抑制用DNA导入植物所必需的载体，以及使用这些抑制催泪成分基因表达的反复和抑制了催泪成分生成基因表达的植物。

摘要： 本发明公开了一种山梨糖脱氢酶基因、山梨酮脱氢酶基因与吡咯喹啉醌合成基因簇ABCDEN的组合基因，是序列表中SEQ ID No.6所述核苷酸序列。本发明的方法通过构建山梨糖脱氢酶基因、山梨酮脱氢酶基因与吡咯喹啉醌合成基因簇ABCDEN不同组合方式的氧化葡糖杆菌重组菌，能明显提高与巨大芽孢杆菌混合培养中的2-酮基-L-古龙酸的产量，最高能提高20%。

摘要： 本发明提供一种脱卤素酶基因LinB、脱卤素酶、脱卤素酶基因工程菌及其构建方法和应用方法。其中，脱卤素酶基因LinB包括(a)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；(b)编码SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的核苷酸序列；或(c)，(a)或(b)的变异体。脱卤素酶包括SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列编码的多肽；SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列；或其变异体。脱卤素酶基因工程菌的构建方法包括将脱卤素酶基因LinB克隆入重组表达载体，导入宿主细胞，获得能够表达脱卤素酶的脱卤素酶基因工程菌。