PDGFR信号通路促进星形胶质细胞和成纤维细胞共培养时细胞簇的成团效应

摘要

目的 探讨血小板衍生生长因子受体(PDGFR)信号通路对小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖的影响.方法 取出生1～3 d的小鼠乳鼠大脑皮质培养星形胶质细胞,取脑膜培养成纤维细胞,免疫细胞化学荧光染色胶质纤维酸性蛋白(GFAP)鉴定星形胶质细胞纯度,染色纤连蛋白(FN)鉴定成纤维细胞纯度.通过向小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞共培养细胞体系中加入细胞因子血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激细胞或抑制剂AG1296进行干预,观察各组细胞增殖情况,Western blot检测共培养细胞系中p-PDGFR-β、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)的表达变化.结果 鉴定结果显示星形胶质细胞和成纤维细胞的细胞纯度达到90％.显微镜下观察显示,加入PDGF-BB后星形胶质细胞和成纤维细胞共培养体系增殖明显并形成团块,给予抑制剂AG1296则增殖受到抑制,团块明显减少.Western blot结果显示加入PDGF-BB时,p-PDGFRβ、p-Akt表达增多(P＜0.01);给予抑制剂AG1296则表达减少(P＜0.05).结论 PDGFR信号通路促进体外小鼠脑星形胶质细胞和成纤维细胞的增殖.