用顺序特异引物聚合酶链反应技术行HLA-A抗原DNA分型

摘要

作者采用顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ），建立了汉族人群ＨＬＡ－Ａ位点ＤＮＡ分型方法。研究采用ＰＣＲ－ＳＳＰ对３４５例肾移植供受者样本ＤＮＡ行ＨＬＡ－Ａ位点基因分型均获得成功。共检出Ａ位点等位基因总数６３５个，其中纯合子５５例，杂合子２９０例；可准确分辨ＨＬＡ－Ａ位点等位基因２０个，无假阳性和假阴性出现，重复率１００％，总耗时５小时。分型结果经标准ＤＮＡ验证和美国加州大学配型中心双盲验证完全符合。与标准血清学方法比较显示，６９份血清学空白位点中１６份存在第二个位点，１３份血清学分型错误，血清学总误差率９．０％。由此表明，用该研究建立的ＰＣＲ－ＳＳＰ方法行ＨＬＡ－Ａ位点ＤＮＡ分型，具有高分辨度、高特异性和简捷快速的特点，分型结果较血清学方法更加精确可靠，适合于临床应用。