ACS和ACO基因克隆及植物转化

摘要

根据已知序列设计ＰＣＲ引物，分别扩增氨基环丙烷羧酸合酶和氨基环丙烷羧酸氧化酶基因并克隆到中间载体，经限制性内切酶酶切图谱分析，部分序列分析以及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹鉴定后，将两个基因单个或相互串联后反向亚克隆至植物表达载体ｐＢＩ１２１。经农杆菌ＬＢＡ４４０４转化番茄子叶，在抗性培养基上得到８株ＡＣＳ基因反义绵小根小苗以ＡＣＳ基因的酶切小片段作为探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，证明获得了两株阳性转化