紫杉醇合成酶基因克隆与转化产胶植物的研究

摘要

本文利用分段RT-PCR法成功地从云南红豆杉叶片总RNA中分离出2条长约1.4kb和1.5kb的cDNA片段,克隆到pUCm-T载体中,序列拼接分析表明,该cDNA片段与WildungMR等发表的紫杉二烯合成酶基因编码区2586bp有41个核苷酸不同,同源性为98.42％,具有编码862个氨基酸的能力.为了检测所克隆的基因编码产物是否具有活性,并进一步制备抗体以便于将来转基因植物的检测,构建了一个酵母表达载体GAPA-T14;为了转化植物构建了2个具有不同启动子的植物表达载体,pBI121-T14(含35S启动子)和pBIH-T14(胶乳特异启动子取代35S启动子).