旁路活化补体激活内皮细胞表达趋化因子及其NF-kB调控作用的实验研究

摘要

目的研究旁路活化补体在一定条件下直接激活内皮细胞表达趋化因子白介素(IL-8)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、以及核转录因子kappa B(NF-kB)在其中的调控作用.方法用酵母多糖活化人血清(ZAHS)直接作用于体外培养的人脐静脉内皮细胞单层(HUVECS):放射免疫法(RIA)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测IL-8和MCP-1的表达水平;凝胶电泳迁移率(EMSA)方法测定NF-kB的活化.结果 (1)ZAHS(1:30)能够诱导内皮细胞表达IL-8和MCP-1,但二者时相变化明显不同.IL-8从4小时开始即有明显上升;而MCP-1水平则从8小时才开始有显著增加.(2)ZAHS能够激活NF-kB,30分钟时即有活化,60分钟明显增加,120分钟达到高峰.NF-kB抑制剂PDTC(pyrrolidine dithiocarbamate,20μmol/L)预先处理HUVECS 单层2小时,可以明显降低IL-8和MCP-1的表达(P<0.05).结论旁路活化补体能直接在转录水平诱导人脐静脉内皮细胞表达IL-8和MCP-1, 这一过程至少部分通过NF-kB的活化来调控.