缺氧预处理的脂肪间充质干细胞对小鼠硬皮病模型的治疗作用

摘要

目的 观察脂肪间充质干细胞(adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs)及缺氧预处理的ADSCs(hypoxia-pretreated ADSCs,hpADSCs)对硬皮病小鼠皮损组织的治疗作用.方法 分离提取小鼠的脂肪间充质干细胞,体外培养至第3代后,部分细胞进行缺氧预处理.使用博来霉素(bleomycin,BLM)对小鼠进行造模,根据处理方式分为PBS处理的空白对照组、BLM模型组、ADSCs治疗组、hpADSCs治疗组.各组皮损样本石蜡切片分别进行H-E染色、Masson染色,检测真皮厚度、羟脯氨酸评估胶原水平,检测H2O2评估氧化应激水平,使用Western印迹法和免疫组化评估α-SMA及TGF-β的表达水平.结果 与空白对照组相比,BLM模型组真皮厚度和组织内H2O2水平明显增加(P＜0.05),α-SMA和TGF-β表达水平也有一定程度的上调.虽然ADSCs治疗能够一定程度上降低真皮厚度,但是差异无统计学意义(P＞0.05),而hpADSCs治疗能够显著降低小鼠真皮厚度(P＜0.05).ADSCs与hpADSCs治疗均能够明显降低组织内H2O2水平(P＜0.05).相比ADSCs治疗,hpADSCs治疗能够更好地降低真皮内TGF-β和α-SMA的表达水平.结论 ADSCs能够降低硬皮病小鼠的胶原沉积并下调氧化应激水平,hpADSCs有更好的治疗效果.