大鼠皮肤成纤维细胞MyoD cDNA转染后的形态变化

摘要

目的探讨运用肌肉转录调节因子(myoblast-determining,MyoD)基因转染使大鼠皮肤成纤维细胞(dermalfibroblasts,DFs)转化为肌细胞的可能性。方法采用差速贴壁法培养Sprague-Dawley(SD)大鼠的DFs;利用携带MyoD cDNA的真核表达载体pLenti6/V5-DEST-MyoD转染培养的大鼠DFs,经Blasticidin筛选2周后挑选转基因单克隆细胞,传代培养,进行细胞形态学观察及细胞免疫化学鉴定。结果大鼠DFs在导入MyoD cDNA后可见:(1)部分细胞形态发生改变,类似骨骼肌细胞,胞体伸展,胞浆颗粒增多;(2)经抗Desmin抗体的细胞免疫化学检测证实转染后的细胞有下游蛋白Desmin的阳性表达。结论DFs能转化为具有潜在功能的类骨骼肌细胞,提示DFs可成为心血管疾病基因治疗的靶细胞。