pemt2-cDNA转染抑制大鼠肝癌CBRH-7919细胞周期相关蛋白的表达

摘要

目的:探讨磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶2(PEMT2)的转染抑制肝癌细胞增殖的分子机制.方法:将带有完整pemt2-cDNA的质粒转入大鼠肝癌CBRH-7919细胞,筛选出稳定传代并高表达PEMT2的细胞株,用免疫印迹杂交技术比较了细胞周期调控因子cyclinD1/CDK4、cyclinE/CDK2、pRb、caspase3、c-jun以及小窝蛋白caveolin的表达变化.结果:CBRH-7919细胞过表达PEMT2后,cyclinD1和cyclinE表达水平不受影响,而CDK4表达减少13％,CDK2表达减少33％,pRb蛋白表达减少80％;与对照组相比凋亡执行蛋白caspase-3表达增加1.2倍,而原癌基因c-jun表达明显减少;小窝蛋白caveolin-1和caveolin-2表达水平没有明显变化.结论:pemt2-cDNA的转染可能通过降低CDK2的表达水平,使有活性的cyclinE/CDK2复合物减少,进而影响pRb蛋白的磷酸化,抑制肝癌细胞由G1期进入S期,从而影响细胞周期进程,抑制肝癌细胞增殖.原癌基因c-jun的过度表达对肿瘤细胞的增殖是有利的,pemt2-cDNA的转染抑制了c-jun表达,激活了caspase3的表达,诱发细胞发生凋亡,这可能是pemt2抑制肝癌细胞增殖的机制之一.另外,PEMT2过表达后对细胞生长的影响不是通过小窝蛋白起作用的.