FAK的活化促进悬浮肺肿瘤细胞的积聚、凋亡抑制与增殖

摘要

【目的】研究在悬浮状态下细胞聚集与细胞凋亡和增殖的关系,以及参与细胞聚集的分子信号传导?【方法】 镜下观察不同肺上皮细胞悬浮状态聚集作用的改变;DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;用MTT和台盼蓝细胞排斥实验检测细胞增殖;磷酸化蛋白的检测用免疫沉淀和Western blot; RNA interference沉默实验采用逆转录病毒载体感染的稳定表达细胞株?【结果】 肿瘤细胞在 polyHEMA悬浮状态下脱离细胞外基质不仅能够存活,而且不同细胞形成大小不同的聚集体:人类大细胞肺癌H460和人肺腺癌H1792细胞株的细胞聚集体大而紧密;人肺腺癌A549和SK-LU-1细胞聚集体小而松散;正常狗肾上皮细胞MDCK几乎不形成聚集体,这与它们的恶性程度来源有关?在悬浮状态下正常细胞MDCK发生凋亡? 细胞聚集体间的相互作用能够促进悬浮状态下肿瘤细胞的增殖?磷酸化FAK的水平和聚集体的大小有关,沉默FAK蛋白的表达能够部分地阻断肿瘤细胞聚集体的形成?【结论】肿瘤细胞脱离细胞外基质形成的聚集能力是判断肿瘤恶性程度和转移特性潜在的标志物?聚集体细胞间的相互作用能够抑制细胞凋亡和促进细胞增殖?聚集体的形成与FAK磷酸化有关?