胎肝造血期胎肝间充质干细胞的分离、培养及生物学特性

摘要

[目的]分离、培养人胎肝造血期胎肝间充质干细胞(MSC),研究其生长特性及表面标记的表达.[方法]取孕16～20周人胚胎肝脏,分离培养胎肝MSC,传代培养成系并检测其增殖能力,应用流式细胞术、免疫荧光方法检测其造血相关表面标记和细胞蛋白表达.[结果]人胎肝MSC呈成纤维样形态,指数生长期倍增时间约为16h,细胞增殖26.5倍.传代15次仍有94.18%的细胞处于G0/G1期.流式细胞仪检测结果显示人胎肝MSC表达CD29、CD44、CD105、CD106和CD166,不表达CD31、CD34、CD45,不表达与GVHD相关的HLADR、CD80、CD86、CD40、CD40L.免疫荧光检测结果显示胎肝MSC表达造血微环境细胞外基质蛋白Fibronectin、α-SMA及上皮细胞标记蛋白AFP和E-cadherin.[结论]人胎肝MSC具有胚胎造血组织和发育中的肝脏特异的相关分子表达,免疫原性弱,可以作为研究造血、胎肝发育机制的模式细胞.