前列腺素E2体外主要通过活化受体EP4促进人CD34+细胞增殖

摘要

[目的]明确介导前列腺素E2(PGE2)促进人CD34+细胞增殖的具体受体亚型.[方法]收集2013年6月至2014年10月期间18例健康志愿者经G-CSF动员的外周血,采用免疫磁珠法分选人CD34+细胞,并用流式细胞术鉴定其纯度;用qRT-PCR检测经PGE2作用后的人CD34+细胞中PGE2四个亚受体(EP1～EP4)mRNA表达情况;根据处理方法不同,将人CD34+细胞分为对照组、前列腺素E2(PGE2)组、前列腺素E2受体EP2激动剂(EP2A)组、EP2A+前列腺素E2受体EP2拮抗剂(EP2AA)组、前列腺素E2受体EP4激动剂(EP4A)组及EP4A+前列腺素E2受体EP4拮抗剂(EP4AA)组,每组3例,分别接受上述组药物处理,采用集落形成实验检测红系集落形成单位CFU-E、红系爆式集落形成单位BFU-E、粒系集落形成单位CFU-G、单核系集落形成单位CFU-M、粒-单核系集落形成单位CFU-GM及粒、红、单核、巨核系集落形成单位CFU-GEMM集落形成情况;用流式细胞术检测细胞周期分布;用Real time-PCR检测CD34+细胞内survivin-mRNA水平、Western blot检测胞浆内β-catenin和survivin蛋白表达情况.[结果]人CD34+细胞可表达PGE2的四个亚受体,但主要表达受体EP2和EP4;PGE2作用后,EP2和EP4 mRNA表达量较对照组明显升高,而EP1和EP3的mRNA表达变化不明显;EP4A可促进人CD34+细胞各系造血集落形成;EP4可促进人CD34+细胞进入细胞周期,使G2/M期比例增加;EP4A可促进凋亡抑制蛋白survivin的mRNA和蛋白表达、β-catenin蛋白表达.[结论]前列腺素E2体外主要通过受体EP4促进人CD34+细胞增殖.