脊柱结核病椎骨中利福平浓度HPLC测定方法研究

摘要

目的建立利福平在脊柱结核髂骨与病椎骨中药物浓度的反相高效液相色谱分析方法.方法以利福喷丁为内标,采用氯仿为萃取剂处理骨匀浆样品,加入二乙胺解除利福平对骨基质的吸附.分析柱为Hypersil BDS C18柱(150 mm×4.6 mm),以0.2 mol·L-1KH2PO4(pH=4.0)-乙腈(65:35)为流动相,流速1.0ml·min-1,检测波长254 nm,内标法定量.结果在0.0560～1.875μg·g-1骨匀浆浓度(相当于骨中浓度0.5600～18.75μg·g-1)范围内利福平和内标峰面积比与骨样本利福平浓度呈良好线性关系(r=0.9994),萃取回收率在88.47%～96.51%(n=5),方法回收率为98.85%～103.51%(n=5),日内、日间RSD分别为2.34%～4.58%,3.38%～5.79%,(n=5).结论本方法准确、精密度高、重复性好,是一可靠的测定骨中利福平浓度的方法,适用于脊柱结核手术患者体内正常及病椎骨组织中利福平浓度的定量分析,以便于个体化抗结核化疗方案的判定与改进.