鼠抗CD71单抗轻链及重链可变区基因的克隆和序列分析

摘要

目的获得鼠抗人CD71分子单抗的轻链及重链可变区基因.方法用一步法提取总RNA,逆转录形成cDNA,设计并合成一套扩增小鼠重、轻链可变区的通用引物,通过PCR扩增基因,分别克隆入pMD18-T载体中,作核苷酸序列分析.结果用重链引物扩增获得长约350 bp的片段,用轻链引物扩增获得长约330bp的片段,序列测定获得它们的DNA序列.结论克隆的重链可变区基因长度为348 bp,属于小鼠H链可变区Ⅰ A亚组;克隆的轻链可变区基因长度为336 bp,属于小鼠κ轻链可变区Ⅱ亚组.