全血中性粒细胞分离方法对fMLP诱导极性化的影响

摘要

目的 比较Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法两种常用的中性粒细胞分离方法,为中性粒细胞极性化研究提供有效手段.方法 取健康成年人外周血,采用Percoll非连续密度梯度离心法和Dextran沉降法分离中性粒细胞,分别检测分离后的中性粒细胞的极性、纯度、存活率,比较二者对极性信号分子F-actin的聚合和胞内Ca2+的影响.结果 二者在极性率、纯度、存活率方面并不存在显著性差异,但Dextran沉降法在fMLP诱导细胞极性3 min内对F-actin的聚合产生抑制作用,同时可使胞内Ca2+升高的Ca2+峰降低约25%.结论 对PMNs极性功能研究时,两种分离方法都可以选择.Percoll非连续密度梯度离心法更有优势,但在需要纯化大量PMNs时,Dextran沉降法也是一种好的选择.