【目的】构建猪淋巴细胞基因文库，初步绘制正常猪外周血淋巴细胞的基因表达谱，为进一步筛选免疫相关基因提供平台。【方法】以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与质粒载体连接后转化大肠杆菌，进一步扩增后，获得猪外周血淋巴细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合，并进行序列分析和注释。【结果】构建了正常猪外周血淋巴细胞cDNA文库，获得库容量为1．2×106PFU／mL、重组率为93．3％、85％插入片段处于750～2000bp的高质量文库；随机测定1100条ESTs，经拼接和聚类，获得152条高表达的基因重叠群（Contigs）和619条低表达基因——单拷贝的EST（Singletons）；经序列比对分析，发现23．3％ESTs为与任何物种都没有匹配的新基因，75．9％ESTs为与猪没有匹配的新基因。用GO数据库对获得的EST进行基因功能分类和KEGG路径图分析，发现丝裂原活化蛋白激酶途径（Mitogenn—activated protein kinase，MAPK）、钙信号通路、胰岛素信号通路、脂肪细胞因子信号通路、Toll—like受体信号通路、B细胞受体信号通路和T细胞受体信号通路的基因均有较高表达。【结论】大部分的猪外周血淋巴细胞基因尚未被分离和鉴定出来，但这些基因mRNA转录和表达丰度均较高，且在猪外周血淋巴细胞中起着非常重要的作用。
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