黄沙鳖致病性温和气单胞菌的分离鉴定及其毒力基因检测

摘要

[目的]明确广西不同养殖区域患病黄沙鳖的病原菌及其毒力基因携带情况,为黄沙鳖细菌性疾病的有效防控及病原菌毒力监测研究提供科学依据.[方法]以常规方法进行病原菌分离鉴定,通过16S rRNA基因序列确定其系统发育地位,并以PCR检测病原菌的6种毒力基因.[结果]从广西6个养殖区10个黄沙鳖养殖场的病样中分离获得10株病原菌,经API 20NE半自动微生物鉴定系统和16S rRNA基因鉴定均为温和气单胞菌(Aeromonas sobria),与Aeromonas sobria ATCC43979亲源关系最近(同源性达99.5％～99.9％).6种毒力基因中hly、Aer和Alt基因的阳性检出率为100％,Act基因为90％,ahal和ahp基因为80％.病原菌株的毒力基因型共有4种,其中,hly+Aer+Alt+Act+ ahal+ahp+是主要毒力基因型(占70％),其余3种毒力基因型分别是hly+Aer+Alt+ Act-ahal+ ahp-、hly+Aer+Alt+Act+ ahal-ahp+和hly+Aer+Alt+Act+ ahal-ahp-,各占10％.[结论]hly和Aer基因是黄沙鳖源温和气单胞菌的主要毒力基因,而Alt、Act、ahal和ahp基因对其致病力起协同作用,即在所检测的6种毒力基因中若只缺失Alt、Act、ahal和ahp基因中的1～2种对黄沙鳖源温和气单胞菌致病力影响不明显.