抗中华眼镜蛇毒鸡卵黄抗体的制备及其效价测定

摘要

目的探索免疫鸡制备高效价抗眼镜蛇毒抗体的新方法. 方法用中华眼镜蛇原毒作抗原免疫22周龄的莱航母鸡,水溶法粗提抗体, DEAE Sepharos FF柱纯化, 切向流超滤膜脱盐及浓缩,免疫电泳及双向免疫扩散法进行鉴定及效价测定, 采用 BCATMProtein Assay Kit 测定蛋白含量. 结果鸡卵黄经水溶法的粗提物与中华眼镜蛇毒即有较明显沉淀反应,其效价随着纯度的提高而增强.将马源性抗血清的蛋白质含量调至与浓缩的IgY相同(2mg/ml),经双向免疫扩散及免疫电泳鉴定,该抗体不但对中华眼镜蛇毒有特异性结合,与孟加拉眼镜蛇毒亦有较强的交叉免疫活性,其效价较马抗眼镜蛇毒血清高4倍以上. 结论用中华眼镜蛇原毒制备的IgY抗体,其效价较马抗血清有显著提高,并与孟加拉眼镜蛇毒有高度交叉免疫.本实验为抗眼镜蛇IgY的应用及其它抗蛇毒IgY的制备奠定了基础.