小鼠Znf230基因启动子与LacZ报告基因融合载体的构建及其在细胞中的表达

摘要

通过PCR扩增和限制性内切酶酶切克隆,获得1990bp的小鼠Znf230基因上游序列,经序列测定和P-Match软件分析,发现该段序列中可能含有2个CAAT-box、若干个性别决定因子Sry、Sox5、Sox30,以及数个参与胚胎期器官发生的基因HoxA3、Pax2、En1等的结合位点.为了研究此段序列的调控功能,构建了该段序列与LacZ基因融合的表达载体pMZnf230pro-LacZ.然后通过转染HeLa和NIH3T3细胞,发现pMZnf230pro-LacZ载体在两种细胞中都表达β-半乳糖苷酶,说明此段序列具有启动子功能.