固态发酵贵州绿僵菌产壳聚糖酶的亲和层析纯化及其性质研究

摘要

目的寻找壳聚糖酶新酶源并简化壳聚糖酶纯化工艺。方法将贵州绿僵菌固态发酵物粗提液经交联壳聚糖树脂层析,以5‰Cu2+洗脱,洗脱液透析浓缩后经Superdex75层析。结果该菌株在发酵120h时,每克干培养基酶活力可达(83.09±2.9)U。经亲和层析和分子筛分离可获得电泳纯的壳聚糖酶,酶活力回收率为43.52%。每克干培养基可获壳聚糖酶328μg,比活达106.39U/mg。酶蛋白相对分子质量为50.3×103。结论固态发酵贵州绿僵菌生产壳聚糖酶可作为壳聚糖酶的新酶源。用交联壳聚糖树脂亲和层析、Cu2+洗脱和分子筛分离的方法可以纯化壳聚糖酶。