玉米CMS-C同质异核、同核异质系叶绿体基因组比较分析

摘要

[目的]基于玉米细胞质雄性不育材料粗制线粒体DNA高通量测序数据,对叶绿体基因组进行组装.[方法]应用Illumina Hiseq 2500平台进行线粒体DNA测序.利用软件Velvet对过滤后的clean reads进行拼接和叶绿体基因组的组装.采用在线注释软件DOGMA(http://dogma.ccbb.utexas.edu/)对叶绿体基因组完整序列进行基因预测和基因功能分析.[结果]成功组装出C48-2和C黄早四2个不育系及48-2和黄早四2个保持系的叶绿体基因组,大小分别为140473 bp(C48-2)、140478 bp(C黄早四)、140458 bp(48-2)、140448 bp(黄早四),均包含84种编码基因,30种tRNA基因,4种rRNA基因.新组装的4个叶绿体基因组,在基因组大小及所包含的基因种类及数量方面都与叶绿体参考基因组具有较高的相似性,说明粗制线粒体的高通量测序数据可以用来组装叶绿体基因组.叶绿体基因组高度保守,但也存在SNP及InDel,基于不育系与保持系叶绿体DNA(cpDNA)的SNP位点设计特异引物,可用来鉴定区分CMS-C不育胞质与正常胞质.[结论]利用粗制线粒体DNA的高通量测序数据可以完成叶绿体基因组的组装,玉米CMS-C不育系与保持系的叶绿体基因组具有高度的一致性,但也存在一些多态性位点,基于多态性位点成功开发出可区分CMS-C不育胞质与正常胞质的特异标记.