银染差异显示方法的建立及其条件的优化

摘要

mRNA差异显示技术是辨析差异表达基因的强有力的工具。本实验旨在优化无同位素的银染差异显示方法。以总RNA为模板,反转录成cDNA,PCR产物在变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳,用银染的方法显示cDNA条带,其结果为:RNA模板在2μg以上时,可以扩增出较多的条带,而低于1μg时条带数目减少;在38～40℃范围内,40℃扩增的条带多而清晰;优化银染程序。