低剂量双酚A及邻苯二甲酸二乙基己酯对PC3细胞增殖的影响

摘要

目的:探讨低剂量环境内分泌干扰物双酚A(Bisphenol A,BPA)和邻苯二甲酸二乙基己酯(Di-2-ethylhexylPhthalate,DEHP)对PC3细胞增殖的影响.方法:PC3细胞用含10%胎牛血清的F12培养基培养,将处于对数生长期的细胞制成104/ml的细胞悬液,按100μl/孔容积加入96孔板,24 h后分别加入BPA、DEHP、雌二醇(Estradiol,E2)和双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)10μl/孔,终浓度为0、0.0001、0.001、0.01、0.1、1、10、100、1 000、10 000、100 000 nM,每个剂量设3个复孔,重复2次,24 h后加入CCK8 10μl/孔,37℃孵育4 h后450 nm处检测吸光度;然后在培养液中加入终浓度为0.1 μM/ml的他莫昔芬(Tamoxifen,Tam)拮抗雌激素受体(Estradiol Receptor,ER)的作用,用能明显促进细胞增殖的0.01、0.1、1、10、100 nM剂量,再次对PC3细胞进行染毒,同样方法检测4种物质作用PC3后的吸光度.结果:10 nM和100 nM的BPA,0.01 nM、0.1 nM和10nM的E2,0.01、0.1、1、10、100、1000、10 000、100 000 nM的DEHP均有促进PC3细胞增殖的作用,而DHT却无这种影响,用TAM封闭ER功能后,0.1、1、10、100nM的BPA、DEHP、E2、DHT均有促进PC3增殖的效果.结论:低剂量环境内分泌干扰物BPA和DEHP可促进PC3细胞增殖,作用机制与E2相似;而当ER被封闭后,DHT却呈现出促细胞增殖作用.