绿袍散及原料药中5种非法添加黄色染色剂的检测

摘要

目的 建立可同时检测绿袍散及其原料中5种(金胺O、柠檬黄、日落黄、金橙Ⅱ和酸性橙10)非法添加黄色素的高效液相色谱二极管阵列检测器(ultra performance liquid chromatography-diode array detector,UPLC-DAD)检测方法,用于快速筛查绿袍散及原料中的非法添加染色色素.方法 色谱柱为Acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相分别以甲醇为流动相A、0.02 mol/L乙酸铵为流动相B进行梯度洗脱;柱温40°C;流速0.3 ml/min,检测波长:金胺O和柠檬黄为432 nm,日落黄、金橙Ⅱ和酸性橙10为484 nm;进样量:2μl.采用超高效液相色谱串联质谱(ultra performance liquid chroma-tography tandem mass spectrometry,UPLC-MS)对UPLC-DAD检出色素的疑似阳性样品进行佐证和确认.结果 5种色素对照品溶液在一定浓度范围内线性关系良好,线性相关系数(r)均大于0.9997;精密度良好,相对标准偏差(RSD)均小于1.03％;重复性良好;柠檬黄、日落黄、酸性橙10、金胺O和金橙Ⅱ峰面积的RSD分别为2.73％,2.92％,1.97％,1.56％和1.58％,表明该供试品溶液在24 h之内稳定性良好;回收率均在96.33％-99.34％之间.10批绿袍散样品中均未检出上述5种非法添加黄色素,6批原料药中仅有一批原料药(黄柏)中检出金胺O.结论 UPLC-DAD技术应用快速、灵敏,且容易推广,可作为筛查绿袍散及其原料中5种非法添加黄色染料的检查方法.