miR-448在蛛网膜下腔出血发生发展中的作用

摘要

目的 探讨miR-448在蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)中的生物学作用.方法 通过血管内穿刺法构建SAH动物模型,36只大鼠被随机平分为假手术组(sham组)和模型组(SAH组),RT-PCR检测miR-448在两组中mRNA的表达,利用TUNEL和Bcl-2双染检测SAH时神经细胞的凋亡,Western blotting检测SAH时Bcl-2蛋白的表达.通过生物信息学软件(miRDB)预测miR-448的靶基因,双荧光素酶报告基因实验分析miR-448对Bcl-2靶向作用.大鼠主动脉血管内皮细胞RAOEC分为control组、miR-448+AS组和miR-448组,分别转染无意义小链、miR-448+反义链miR-448和miR-448.采用Western blotting检测miR-448对Bcl-2蛋白表达水平的影响,AnnexinⅤ-PI检测miR-448对细胞凋亡的作用.结果miR-448在SAH组中表达显著高于sham组(P<0.05).与sham组比较,SAH组神经细胞凋亡增加,Bcl-2表达下调(均P<0.05).miRDB预测miR-448的下游靶基因是Bcl-2,且miR-448可与Bcl-2的3′UTR结合并抑制其表达及活性.miR-448组Bcl-2的表达显著低于control组和miR-448+AS组(均P<0.05).结论 miR-448 可以通过抑制 Bcl-2 的表达参与 SAH 的发生发展.