整合素相互作用蛋白Kindlins在肺癌发生发展中的作用

摘要

目的:本研究的目的是探讨Kindlin-1和Kindlin-2在临床肺癌发生发展中的作用及相关机制。方法:应用免疫组化、Westernblotting、RT-PCR检测临床不同组织学类型肺癌组织标本中Kindlin-1和Kindlin-2蛋白和mRNA表达水平及差异;应用Western blotting、RT-PCR检测检测肺癌细胞株中Kindlin-1和Kindlin-2蛋白和mRNA表达水平;应用RNA干扰、RT-PCR,真核基因表达等技术检测Kindlin-1和Kindlin-2过表达和沉默后基因表达水平的改变、Wnt信号通路,以及EMT的改变;应用Oncomine数据分析及荷瘤动物等系列实验技术手段,深入探讨了Kindlin-1和Kindlin-2在临床肺癌发生发展中的作用及相关机制。结果:(1)Kindlin-1蛋白表达水平是鳞癌高于腺癌,高于大细胞肺癌,高于小细胞肺癌;(2)Kindlin-2蛋白的表达主要集中在肺癌间质当中,而在癌细胞中的表达水平恰恰与Kindlin-1相反;(3)Kindlin-1的蛋白表达水平在分化好的鳞癌细胞高于分化差的鳞癌细胞,而Kindlin-2仅在低分化的大细胞肺癌中高表达;(4)Kindlin-1促进肺癌细胞的分化,而Kindlin-2促进肺癌细胞的逆分化;(5)在H1299细胞系中高表达Kindlin-1,并通过抑制Wnt信号通路抑制细胞的增殖、迁移、和侵袭,是EMT的相反过程MET;(6)而高表达Kindlin-2则是通过激活Wnt信号通路促进肺癌细胞增殖、迁移、和侵袭作用,促进细胞发生EMT.结论:(1)Kindlin-1和Kindlin-2的表达水平与肺癌的组织学类型有明显关系;(2)Kindlin-1和Kindlin-2调控肺癌Wnt信号通路中起相反的调控作用,二者的平衡可能在调节肺癌细胞细胞增殖、迁移、侵袭和EMT中起重要作用。