DPP-4抑制剂通过Nrf2/HO-1/P21信号通路抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的分子机制研究

摘要

目的 明确DPP-4抑制剂西格列汀对肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,并探讨相关的分子机制.方法 体外培养大鼠PASMCs并随机分为对照组、5-HT组、不同浓度(2.5,5,10,20,40μmol/L)西格列汀预处理+5-HT组,应用BrdU试剂盒检测各组细胞增殖情况并筛选西格列汀作用浓度;用西格列汀刺激PASMCs 24 h,应用Western blot检测细胞中Nrf2及HO-1的蛋白水平.为进一步研究信号通路机制,PASMCs分为对照组、5-HT组、西格列汀+5-HT组、Nrf2抑制剂ML385+西格列汀+5-HT组、HO-1抑制剂SnPP+西格列汀+5-HT组、P21 siRNA预转染+西格列汀+5-HT组,采用BrdU掺入法检测各组细胞增殖情况,应用Western blot检测各组细胞中P21的蛋白水平.结果 20 mol/L西格列汀+5-HT组PASMCs增殖率明显低于5-HT组(P<0.05),且20μmol/L西格列汀作用24 h,Nrf2及HO-1的蛋白表达均高于对照组(P<0.05).进一步机制研究发现,与5-HT组相比,西格列汀+5-HT组的P21表达水平升高(P<0.05),而预先给予Nrf2或HO-1抑制剂联合西格列汀,P21水平的上调被逆转(P<0.05).而且预先联合Nrf2或HO-1抑制剂或预转染P21 siRNA,西格列汀对PASMCs增殖的抑制作用也被逆转(P<0.05).结论 DPP-4抑制剂西格列汀可通过激活Nrf2/HO-1/P21信号通路,进而抑制PASMCs增殖.