miR-5047通过靶向下调TIPE3表达抑制前列腺癌细胞迁移和增殖

摘要

cqvip:目的观察微小RNA(miR-5047)在前列腺癌细胞株中的表达,探讨其对TIPE3基因表达的调控.方法采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-5047在4种前列腺癌细胞株(C4-2B、LNCaP、DU-145、PC-3)和正常前列腺滤泡细胞RWPE-1中的表达.以表达量最低的细胞为感染对象,使用慢病毒Lenti-阴性对照序列(miR-NC)和Lenti-miR-5047分别感染细胞,分别命名为对照组和实验组.RT-qPCR检测感染后细胞中miR-5047的表达.细胞划痕实验和MTT法分别检测两组细胞的迁移和增殖能力.基于microRNA.org数据库对miR-5047进行靶基因预测.双荧光素酶报告基因检测验证miR-5047的靶基因.RT-qPCR和Western blot检测两组细胞中靶基因在mRNA和蛋白水平的表达.结果与正常前列腺滤泡细胞RWPE-1相比,在前列腺癌细胞中miR-5047的表达明显降低(P<0.05),在C4-2B细胞中表达最低(P<0.01).与对照组相比,实验组C4-2B细胞中miR-5047的表达明显增加(P<0.01).与对照组相比,实验组C4-2B细胞的迁移能力降低(P<0.01).实验组C4-2B细胞的增殖能力从第2天开始低于对照组(P<0.05).microRNA.org数据库显示miR-5047的靶基因是肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样因子3(tumor necrosis factor-αinduced protein 8 like 3,TIPE3),双荧光素酶报告基因检测证实miR-5047可与TIPE3互补结合(P<0.01).与对照组相比,实验组细胞中TIPE3 mRNA和蛋白水平的表达明显降低(P<0.01).结论miR-5047在前列腺癌细胞株中呈低表达,miR-5047可能通过下调TIPE3基因的表达,抑制前列腺癌C4-2B细胞的迁移和增殖能力.