miR-22表达载体的构建及其对结直肠癌细胞HCT116增殖的影响

摘要

目的 构建pcDNATM6.2-GW-miR-22表达载体,并检测其对结直肠癌HCT116细胞增殖的影响. 方法 人工合成pre-hsa-miR-22基因片段,应用分子克隆技术构建pcDNATM6.2-GW-miR-22表达载体,酶切、DNA测序及BLAST验证;瞬时转染HCT116细胞,应用RT-PCR检测miR-22表达水平,MTT实验检测miR-22对HCT116细胞增殖的影响. 结果 酶切及测序结果验证miR-22表达载体构建成功;转染HCT116细胞后miR-22表达水平显著增高;MTT结果表明miR-22对细胞增殖具有抑制作用. 结论 本研究成功构建miR-22真核表达载体,证明miR-22高表达可以抑制结直肠癌细胞HCT116的增殖.