外源褪黑素对羔羊卵母细胞成熟及卵丘扩展相关基因表达的影响

摘要

目的 本研究旨在探究在羔羊卵母细胞体外成熟培养过程中,添加外源褪黑素对羔羊体外受精胚胎发育质量以及卵丘扩展相关基因表达的影响.方法 在成熟培养液中添加不同浓度(0,10,25和50μg/L)的褪黑激素,研究外源褪黑素对羔羊体外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚DNA核碎片化的影响,通过DCFH-DA染色检测卵母细胞中活性氧含量,通过RT-qPCR技术检测卵丘扩展相关基因(PTX3、HAS2和PTGS2)表达的变化.结果 结果表明成熟液中添加25μg/L褪黑素组的囊胚形成率(19.8％±1.9％)显著高于不含褪黑素的对照组(10.1％±4.1％)(P<0.05).成熟液中添加50μg/L褪黑素产生的囊胚DNA碎片化的比例(2.2％±1.1％)显著低于不使用褪黑素的对照组(10.9％±2.9％)(P<0.05).与对照组相比,添加外源褪黑素组细胞内的活性氧显著降低(P<0.05).添加褪黑素组卵丘细胞扩展相关基因PTX3、HAS2表达量显著高于(P<0.05)对照组,而PTGS2的表达量在各组之间没有显著差异(P>0.05).结论 综上表明,在成熟培养基中添加褪黑素(25μg/L)有益于羔羊早期胚胎的发育和质量.