卵丘细胞

摘要： 目的研究HLA-G分子及其亚型在人卵丘细胞中的表达。方法收集临床行辅助生殖治疗取卵患者的卵丘细胞,共聚焦免疫荧光技术探究HLA-G分子在卵丘细胞的表达和定位,微滴式数字PCR技术对HLA-G各亚型(HLA-G1~HLA-G7)在卵丘细胞内的表达水平进行绝对定量检测。结果卵丘细胞的细胞膜和细胞质中均可见HLA-G分子表达,且HLA-G各亚型呈现差异性表达,其中HLA-G3和HLA-G4的拷贝数分别位列第一和第二,高于其他亚型(P<0.05),膜结合型HLA-G拷贝数显著高于可溶型HLA-G(P<0.001)。结论人卵丘细胞内HLA-G3和HLA-G4亚型表达量较高,膜结合型HLA-G表达水平显著高于可溶型。本研究为了解HLA-G及其亚型在人卵丘细胞表达的功能和作用提供了新的发现。

摘要： 旨在研究干扰类缺失的、小的、同源异形1(absent,small,or homeotic 1-like,ASH1L)甲基转移酶基因表达对牛卵丘细胞表达谱的影响。本研究采用经过筛选的siRNA干扰牛卵丘细胞中ASH1L基因的表达,分别收集干扰组和对照组细胞(野生型)进行RNA测序及基因差异表达、基因功能、信号通路、可变剪切和单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)等生物信息学分析;采用实时定量PCR方法验证测序结果;每个试验3个重复。结果显示,干扰组与对照组细胞共筛选出2046个差异表达基因,其中上调基因1078个,下调基因968个;差异表达基因主要富集到2802个GO条目,如细胞分裂、细胞连接和组蛋白甲基转移酶活性;涉及到白细胞跨内皮迁移、PI3K-Akt、细胞黏附分子等53条KEGG通路。全部表达基因的基因集富集分析结果显示,ASH1L基因参与发育诱导、H3K4特异性组蛋白甲基转移酶活性、组蛋白去甲基化等生物学过程。另外,测序结果鉴出12种可变剪切方式,共117994个可变剪切事件;同时检测到522205个SNPs位点,其中碱基转换的发生频率显著高于颠换。综上所述,ASH1L基因干扰的卵丘细胞和野生型卵丘细胞的表达谱存在差异,推测该基因可能通过细胞黏附分子和白细胞跨内皮迁移等通路调节细胞生长,也可通过可变剪切和SNP影响基因表达,本试验为深入研究ASH1L对卵丘细胞增殖和胚胎发育的调控功能提供理论基础。

摘要： 【目的】研究白藜芦醇(resveratrol,RES)对水牛卵丘细胞体外培养过程中细胞增殖活力、激素分泌、卵丘扩展及抗凋亡和抗氧化能力的影响。【方法】用不同浓度(0(对照组)、1、10、20、30、40、50和60μmol/L)RES培养卵丘细胞,用CCK-8试剂盒测定细胞增殖活力,筛选最佳RES处理浓度及时间用于后续试验。用ELISA法测定培养液中卵丘细胞分泌的雌二醇(estradiol,E_(2))和孕酮(progesterone,P_(4))的含量,实时荧光定量PCR法测定卵丘细胞扩展、凋亡和抗氧化相关基因的相对表达量。【结果】与对照组相比,在体外培养24~36 h内,1、10和20μmol/L RES组水牛卵丘细胞的增殖活力均有升高趋势,10μmol/L RES处理36 h细胞活力最强,因此用于后续试验中细胞的处理。体外培养36 h时,10μmol/L RES组细胞增殖能力和E_(2)、P_(4)的分泌显著增加(P0.05)。【结论】培养液中添加10μmol/L RES能够提高水牛卵丘细胞体外培养的增殖活力,促进卵丘细胞激素分泌和卵丘细胞扩展,并增强卵丘细胞抗氧化能力并减少细胞凋亡。

摘要： 目的 本研究旨在探究在羔羊卵母细胞体外成熟培养过程中,添加外源褪黑素对羔羊体外受精胚胎发育质量以及卵丘扩展相关基因表达的影响.方法 在成熟培养液中添加不同浓度(0,10,25和50μg/L)的褪黑激素,研究外源褪黑素对羔羊体外受精胚胎卵裂率、囊胚率以及囊胚DNA核碎片化的影响,通过DCFH-DA染色检测卵母细胞中活性氧含量,通过RT-qPCR技术检测卵丘扩展相关基因(PTX3、HAS2和PTGS2)表达的变化.结果 结果表明成熟液中添加25μg/L褪黑素组的囊胚形成率(19.8％±1.9％)显著高于不含褪黑素的对照组(10.1％±4.1％)(P0.05).结论 综上表明,在成熟培养基中添加褪黑素(25μg/L)有益于羔羊早期胚胎的发育和质量.

摘要： 卵丘细胞是卵母细胞的重要支持细胞,卵丘细胞的质量影响卵母细胞的体外成熟和发育能力.低氧分压有利于牦牛(Bos grunniens)卵母细胞的体外成熟和发育能力,但是卵丘细胞是否参与该作用尚未见报道.为明确低氧分压对牦牛卵丘细胞转录组的影响,本研究在5％和20％O2的条件下进行牦牛卵丘细胞-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complex,COC)成熟培养,然后收集卵丘细胞进行转录组测序、差异表达基因筛选和qRT-PCR验证.本研究共获得8个转录组文库,总数据量56.17 Gb;基因表达分析表明,两组样品中共有13584个基因得到表达,筛选获得270个差异表达基因,其中229个差异基因在5％O2处理组高表达,41个差异基因在20％O2处理组高表达;基因本体论(Gene Ontology,GO)和KEGG通路富集分析表明,差异表达基因主要富集于糖酵解、卵丘细胞扩散和卵丘细胞-卵母细胞信号传导等生物学过程;在基因组未被注释的区域寻找新基因和新转录本,发现6711个新基因,7209个新转录本,其中829个新转录本具有蛋白编码能力.qRT-PCR结果验证了转录组测序结果准确.上述研究结果提示,低氧分压可能促使牦牛卵丘细胞的转录模式趋同于体内成熟环境,进而促进牦牛卵母细胞的成熟并提高其发育能力.本研究结果为深入研究氧分压对牦牛卵母细胞体外成熟中卵丘细胞-卵母细胞互作机理的影响提供了参考依据.

摘要： 目的 探讨血浆外泌体源性miR-18a-3p靶向调节Cbp/p300结合转化激活因子含Glu/Asp丰富竣基末端域2(Cbp/P300 interacting transactivator with Glu/Asp rich carboxy-terminal domain 2,CITED2)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)卵丘细胞(cumulus cells,CCs)凋亡和细胞周期的影响.方法 qRT-PCR分别对PCOS患者血浆、血浆外泌体及CCs中miR-18a-3p的表达进行检测.将外泌体转染miR-18a-3p模拟物后与CCs共孵育后,采用流式细胞术检测CCs凋亡和周期分布情况.行基因本体论(gene ontology,GO)分析筛选CITED2纳入后续实验.构建pcDNA3.1-CITED载体转染至CCs后再与各组外泌体共培养,探究miR-18a-3p与CITED2联合作用对CCs凋亡、周期分布的影响.结果 PCOS患者分离的血浆外泌体和CCs鉴定成功.相对非PCOS患者的血浆、血浆外泌体和CCs,PCOS患者血浆样本、外泌体、CCs中miR-18a-3p表达明显下降(均P＜0.05).CITED2在CCs中可作为miR-18a-3p的靶点受到其调控.相对于NC组,过表达miR-18a-3p抑制PCOS患者中CCs细胞的G0/G1期分布,并抑制其凋亡(均P＜0.05),但该作用被CITED2部分挽救(均P＜0.05).结论 血浆外泌体中携带的miR-18a-3p能促进CCs细胞周期中S期增多,从而抑制其凋亡,抑制PCOS的进展.血浆外泌体源性miR-18a-3p有望在PCOS的靶向治疗中发挥作用.

摘要： 颗粒细胞(granulosa cell)是卵泡内的体细胞,在卵泡的生长发育过程中发挥着至关重要的作用.随着卵泡发育至窦卵泡期,颗粒细胞分化为在空间和功能上不同的2个种群,即围绕在卵母细胞周围的卵丘细胞(cumulus cell)和排列在卵泡壁上的壁颗粒细胞(mural granulosa cell).卵丘细胞主要为卵母细胞的生长发育提供营养和能量,而壁颗粒细胞主要承担内分泌功能.卵丘细胞与壁颗粒细胞不仅是位置不同,还存在功能、基因等方面的差异.迄今为止,人卵丘细胞和壁颗粒细胞在代谢组学的差异尚少见报道.综述卵丘细胞和壁颗粒细胞差异学的相关研究进展,并提出卵丘细胞和壁颗粒细胞在代谢谱表达上存在差异的新猜想,探究两者之间的差异可能为开发评估卵母细胞和胚胎质量新的标志物提供新思路,这对预测妊娠结局具有重要的临床价值.

摘要： 卵母细胞质量是决定辅助生殖结局的一项重要因素,创建一种简单可靠的卵母细胞质量评价体系有助于提高辅助生殖的成功率.新兴的代谢组学有望成为评估卵母细胞质量的新方法.目前,代谢组学已广泛应用于女性生殖相关的科学研究,通过对卵母细胞、颗粒细胞和卵泡液等样品中的中小分子进行定性和定量分析,研究者们寻找到多种与女性不孕相关的标志性代谢物,涉及糖类、脂质和氨基酸等多种物质的代谢,对于临床不孕症的诊断和治疗具有潜在的应用价值.综述近年哺乳动物卵泡相关的代谢组学研究.

摘要： 研究旨在探讨单宁酸对猪卵母细胞体外成熟质量及其胚胎发育能力的影响.在猪卵丘卵母细胞复合体(COCs)体外成熟培养液中添加不同浓度(0、1、10、100μg/mL)单宁酸培养42 h后,检测COCs的扩散程度和卵丘细胞扩散指数,统计COCs的体外成熟率,检测成熟卵母细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和生长分化因子9(growth differentiation factor 9,GDF9)的水平,并统计孤雌激活及体外受精胚胎48和168 h的卵裂率、囊胚率及囊胚总细胞数.结果 显示,与对照组相比,10μg/mL单宁酸组卵丘细胞扩散指数显著提高(P＜0.05),100μg/mL单宁酸组显著降低(P＜0.05);1和10μg/mL单宁酸组卵母细胞成熟率差异不显著(P＞0.05),100μg/mL单宁酸组卵母细胞成熟率显著降低(P＜0.05);1和10μg/mL单宁酸组GSH和GDF9水平显著提高(P＜0.05),ROS水平显著降低(P＜0.05).孤雌胚胎和体外受精胚胎发育能力结果显示,与对照组相比,各单宁酸组卵裂率差异不显著(P＞0.05),10μg/mL单宁酸组孤雌胚胎囊胚率及体外受精胚胎囊胚率显著提高(P＜0.05),100μg/mL单宁酸组孤雌胚胎囊胚细胞数及体外受精胚胎囊胚细胞数均显著低于其他各组(P＜0.05).以上结果表明,10μg/mL单宁酸可通过提高卵丘细胞扩散能力及GSH和GDF9水平、降低卵母细胞内ROS水平,改善猪卵母细胞成熟质量,提高孤雌胚胎及体外受精胚胎的发育能力.

摘要： 本研究旨在研究有无卵丘细胞对卵母细胞成熟及其胚胎发育能力的影响.本实验分别设裸卵组、卵丘细胞与卵母细胞共培养组、卵丘-卵母细胞复合体(COCs),以检测卵丘细胞对猪成熟卵母细胞的存活率、极体率,孤雌激活后的卵裂率、囊胚率的影响.[结果]COCs组卵母细胞经体外培养42小时后其成熟率最高(95.76％),显著高于裸卵组(88.96％,p＜0.05),虽然也高于卵丘细胞与卵母细胞共培养组,但是差异不显著(92.63％,p＞0.05);COCs组第一极体排出率为71.77％,显著高于共培养组和裸卵组(分别为64.99％,60.48％,p＜0.05);COCs组在后期发育中其卵裂率与囊胚率分别为86.43％,35.55％,显著高于共培养组和裸卵组,而卵丘细胞与卵母细胞共培养组卵裂率及囊胚率(分别为78.76％,27.45％)显著高于裸卵组(47.46％,20.63％,p＜0.05).结果表明,卵丘细胞对卵母细胞成熟及发育均有显著影响,在卵母细胞成熟过程中,卵丘细胞的旁分泌机制及卵母细胞与卵丘细胞的缝隙连接都会对卵母细胞成熟效率产生影响,并且在卵母细胞后期发育中,缝隙连接会对后期发育能力具有明显影响.

摘要： 本试验以机械裸卵(DOs)、卵丘-卵母细胞复合体(COCs)和添加的离散卵丘细胞的不同组合,对卵丘细胞在卵母细胞体外成熟过程中的影响进行了探索,并对不同卵丘细胞的作用途径和强度进行了分析.试验结果显示:添加离散卵丘细胞能够显著促进DOs的体外成熟(57.98±14.27vs35.53±14.00,P＜0.05),对COCs具有促进趋势但差异不显著(76.66±5.77vs66.76±9.46,P＞0.05);卵母细胞胞外卵丘细胞对与之共培养的DOs的体外成熟促进作用效果不明显(35.83±18.32vs35.53±14.00,P＞0.05).分析结果显示:卵母细胞胞外卵丘细胞主要通过间隙连接促进卵母细胞的体外成熟,添加的离散卵丘细胞主要以旁分泌途径促进卵母细胞的体外成熟;3层及其以上胞外卵丘细胞能够提高其包裹的卵母细胞平均体外成熟能力的85.34％,添加的离散卵丘细胞能够提高COC平均体外成熟能力的16.18％,能够提高DO平均体外成熟能力的60.61％.

摘要： 体外获取的卵母细胞其周围包括的卵丘细胞数量不一，传统上将胞质均匀的卵母细胞复合体按卵丘细胞层数分为三类:A类周围有5层以上卵丘细胞包被;B类周围有5层以下，1层以上卵丘细胞包被;C类仅有单层卵丘细胞或无卵丘细胞包被。在卵母细胞培养中，一般C类COCs弃之不用，而B类一直未有定论，而在生产操作中，一般将COCs分为两类，胞质均与包被三层以上的定义为优级卵，三层以下一层以上的定义为次级卵，本研究就此探讨卵丘细胞对卵母细胞成熟、受精和胚胎发育的影响。最后得出优级卵的卵母细胞成熟率显著高于次级卵的，且对这些卵母细胞进行孤雌激活和体外受精后，优级卵母细胞其孤雌胚胎和IVF胚胎的囊胚率也显著高于次级卵的。未去除卵丘细胞的卵母细胞的囊胚率显著高于去除卵丘细胞的等结论。

摘要： 卵丘细胞与卵母细胞共处于同一个卵泡液微环境中，卵丘细胞与卵母细胞之间复杂的“对话机制”调控着卵母细胞的成熟和卵丘细胞的增殖延伸。在窦卵泡阶段，卵丘细胞由颗粒细胞分化而来，通过缝隙连接与卵母细胞共同形成一个结构和功能上的合胞体。卵泡发育不同时期，卵丘细胞对卵母细胞的代谢调控主要表现为：在窦卵泡期，卵丘细胞为卵母细胞发育提供必需的营养，而卵母细胞分泌的信号因子亦调控着卵丘细胞的增殖和延伸;在排卵前卵泡中，卵丘细胞主要通过调控卵母细胞中cAMP水平，促使卵母细胞恢复减数分裂;在排卵后卵泡中，卵丘细胞亦影响着精卵结合及胚胎发育的过程。另外，伴随卵泡内微环境的变化，卵丘细胞与卵母细胞间发生着复杂的信号传递，从而对卵母细胞的发育实现分子水平的调控，其中部分基因可能作为卵母细胞发育成熟、胚胎发育及妊娠结局的分子标记物。最后，对卵丘细胞调控卵母细胞发育的进一步研究方向做出展望。

摘要： 目的：研究授精前剥除卵丘细胞卵子的受精、胚胎发育和临床结局。方法：授精前用机械法剥除卵子外包裹的卵丘细胞，每个卵子采用微滴法单独受精(A组)。对照组(B组)采用常规IVF-ET受精方式进行。比较两组第二极体排出情况、受精率(包括2PN、1PN和3PN)、卵裂率(包括2PN、1PN和3PN)、优胚率、临床妊娠率、种植率和流产率。结果：两组在受精率(包括2PN、1PN和3PN)、卵裂率(包括2PN、1PN和3PN)、优胚率、临床妊娠率、种植率和流产率方面无显著性差异。结论：卵子授精前剥除卵丘细胞不会影响IVF-ET的I临床结局，为利用卵丘细胞进行非侵入性种植前遗传学诊断提供临床依据。

摘要： 旨在观察绵羊卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)的mRNA在体外成熟过程中的表达规律，探明卵丘细胞中组织蛋白酶(CTSS、CTSB)mRNA的表达与卵母细胞体外发育能力之间的相关性。绵羊卵丘细胞中CTSS和CTSB的mRNA表达水平在体外成熟过程中呈下降趋势，其mRNA表达水平与胚胎的发育能力呈负相关；组织蛋白酶特异性抑制剂E-64可下调绵羊卵丘细胞中CTSS、CTSB的mRNA表达水平，并提高卵母细胞随后的体外发育能力。

摘要： 为了进一步探索辽宁绒山羊卵母细胞体外成熟的方法，本试验以屠宰场绒山羊卵巢为材料，采用抽吸法收集直径大于2衄卵泡的卵母细胞，研究卵丘细胞对卵母细胞体外成熟和孤雌发育的影响。

摘要： 目的：观察具有益气血作用的经后增殖方含药血清对超排卵大鼠卵巢中卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-Oocyte Complexes,COCs)及卵丘细胞(Cumulus Cells,CCs)中生长分化因子9(Growth Differentiation Factor9,GDF9)及Bim表达的影响及差异,探讨其治疗效果及作用机制. 方法：制备大鼠超排卵卵巢模型,收集COCs和CCs,分别与雌性SD超排卵大鼠空白血清和经后增殖方药物血清在体外共同培养,各分3组:空白血清组(空白组),含药血清组(对照组),含药血清+GDF9受体阻断剂组(实验组),共6组.24小时后收集COCs和CCs,实时荧光定量PCR(qPCR)检测GDF9和Bim mRNA的表达水平,Western-blot检测GDF9蛋白的表达水平. 结果：(1)组内比较:①COCs:A.对照组GDF9mRNA相对表达水平显著高于空白组和实验组(P＜0.01);B.对照组和实验组Bim mRNA相对表达量均明显低于空白组(均为P＜0.05);C.对照组GDF9蛋白相对表达量明显高于空白组(P＜0.05),高于实验组,但差异无统计学意义(P＞0.05);②CCs:A.GDF9mRNA相对表达水平三组间的差异性比较结果与COCs三组一致;B.对照组和实验组Bim mRNA相对表达量均明显低于空白组(均为P＜0.05);对照组Bim mRNA相对表达量明显低于实验组(P＜0.05);C.对照组GDF9蛋白相对表达量明显高于空白组和实验组(均为P＜0.05).(2)组间比较:COCs对照组GDF9mRNA相对表达水平显著高于CCs对照组(P＜0.01),其余组间比较无显著差异(P＞0.05). 结论：经后增殖方含药血清能提高COCs和CCs中GDF9的表达水平,维持COCs和CCs中Bim表达的低水平的作用,抑制细胞凋亡,促进卵泡发育;COCs较剔除卵母细胞的CCs更有利于GDF9mRNA的表达.

摘要： 卵母细胞分泌的BMP15和GDF9是卵泡生长发育和卵巢功能的重要调节因子.可通过调控Smad信号通路影响卵丘细胞的增殖与凋亡.有研究表明BMP15和GDF9可以影响miR-375的水平,而miR-375的靶基因是BMP15和GDF9的Ⅱ型受体BMPR2,但BMP15/GDF9-miR-375-BMPR2通路是否及如何调控Smad信号通路影响牛卵丘细胞增殖与凋亡尚不清楚.本研究首先通过COCs获得卵丘细胞,在体外培养过程中添加适当浓度的BMP15和GDF9,采用CCK-8法和流式细胞术明确BMP15/GDF9对牛卵丘细胞增殖与凋亡的影响.随后,合成miR-375mimics、miR-375inhibitor和BMPR2siRNA,进行转染处理,通过Western Blot检测转染前后BMP15/GDF9的I型受体ALK4、ALK5、ALK6的表达变化.100ng/ml的BMP15、200ng/ml的GDF9、50ng/ml的BMP15和100ng/mL的GDF9的联合添加能有效抑制牛卵丘细胞凋亡、促进细胞的增殖.BMP15/GDF9可负调控miR-375的表达水平,正调控BMPR2的表达水平.高水平的miR-375和BMPR2的抑制可导致ALK4表达量升高;而抑制miR-375则可得到相反的结果.BMP15、GDF9具有协同效应,可通过miR-375影响I型受体ALK4和Ⅱ型受体BMPR2的表达水平,进而影响卵丘细胞的增殖、扩散及凋亡.

摘要： 体外受精技术是胚胎生产过程中一个重要环节，体外受精效率受到多种因素的影响，本课题研究了卵丘细胞存在与否、精卵共孵育时间、个体精液品质等因素对猪卵母细胞体外受精的影响。通过研究这些影响因素，解决猪体外受精过程中的技术问题，为提高获得体外胚胎的效率和质量提供理论基础，同时对加快品种改良速度等也有重要价值。

摘要： 本发明提供一种用于单细胞RNA测序的羊卵母细胞和卵丘颗粒细胞采集方法，通过对羊卵母细胞、卵丘颗粒细胞分别收集，可保证采样空间上的统一，无需整个卵巢研磨。收集后的卵母细胞和卵丘颗粒细胞可直接用于RNA提取或各种转录组高通量测序。与现有的采样绵羊整个卵巢进行RNA提取比较基因表达的方法相比，本发明的最大特点在于采样时空精准，可进一步提高卵巢采样用于分子试验的精确性。

摘要： 本发明公开了一种人卵母细胞‑卵丘颗粒细胞复合体的体外成熟培养液及培养方法。体外成熟培养液的组分为TCM199培养基+1‑20μMForskolin+10％SPS+100IU/mL青霉素+100μg/mL链霉素。体外成熟培养方法包括以下步骤：当优势卵泡达到18mm时，注射HCG体外促排卵，36‑38h后得到COC，将其转移到体外成熟培养液中培养4h，受精14‑18h，得到的受精卵转入胚胎培养液微液滴中培养2‑4天，得到胚胎。本发明的培养液和培养方法可以显著促进人卵子的成熟和抑制老化，提高囊胚形成率和胚胎的可移植数目，成熟率可达到76.1％，受精率达到78.9％，囊胚形成率达到64.1％。

摘要： 本发明提供了辛酰化Ghrelin在体外促进牛卵母细胞卵丘细胞复合体雌二醇和孕酮分泌中的应用，进而可体外抑制牛卵母细胞减数分裂。通过辛酰化Ghrelin体外培养抑制牛卵母细胞减数分裂的恢复，从而使得卵母细胞核和细胞质同步成熟，进而提高了牛卵母细胞的质量以及体外发育能力。能够成为新型的减数分裂制剂药物在畜牧业生产上推广应用，具有良好的市场效应和社会效应。

摘要： 本发明实施例公开了一种人类卵泡卵丘细胞或/和壁颗粒细胞的细胞系及其制备方法，包括：将人类卵泡卵丘细胞或/和壁颗粒细胞分别进行第一离心获得第一固体；将梯度离心培养液加入到第一固体中，第二离心后分成三层，取所述三层的中间层加入磷酸盐缓冲液第三离心获得第三固体，后加入透明质酸酶溶液、裂解缓冲液，第四离心获得第四固体加入磷酸盐缓冲液第五离心获得纯化细胞，加入培养液中传代培养获得人类卵泡卵丘细胞或/和壁颗粒细胞的细胞系；培养液按体积份数计包括：α‑MEM或DMEM 100份；胎牛血清5‑15份；青链霉素0.5‑1.5份；促卵泡生长激素0.012‑0.02份；成功获得人类卵泡卵丘细胞或/和颗粒细胞的细胞系。

摘要： 本发明提供了STAC2卵丘细胞在评估卵母细胞受精能力中的应用，属于生物工程领域。本发明通过RNA‑seq等技术发现，卵丘细胞的基因组分析可以作为评估卵母细胞质量、胚胎能力和妊娠结果的高通量和非侵入性手段，尤其是STAC2，与合格卵母细胞密切相关，可作为一种生物标志物，用于改善健康胚胎的选择，从而实现良好的妊娠率。

摘要： 本发明提供了辛酰化Ghrelin在体外促进牛卵母细胞卵丘细胞复合体雌二醇和孕酮分泌中的应用，进而可体外抑制牛卵母细胞减数分裂。通过辛酰化Ghrelin体外培养抑制牛卵母细胞减数分裂的恢复，从而使得卵母细胞核和细胞质同步成熟，进而提高了牛卵母细胞的质量以及体外发育能力。能够成为新型的减数分裂制剂药物在畜牧业生产上推广应用，具有良好的市场效应和社会效应。

摘要： 本发明公开了一种高效去除猪未成熟卵母细胞周围卵丘细胞的方法，包括以下步骤：配制以氯化钠作为溶质，TCM199作为溶剂配制成含有1wt％Nacl的液体，测量液体的渗透压，过滤，分装，加热至38.5°C备用；将卵泡液中的卵丘卵母细胞挑到盛有洗卵液的培养皿中，移入盛有400μL 1wt％Nacl液体的1.5mL离心管中，将离心管置涡旋振荡5分钟，再瞬时离心，转移到培养皿中；借助口吸管针将除去卵丘颗粒细胞的卵母细胞转移至TCM199操作液中，且快速清洗3遍，并置于盛有TCM199液滴中恢复5分钟，本发明通过1wt％Nacl处理去除猪未成熟卵母细胞外围卵丘细胞，具有省时、成本低、安全高效等优势。

摘要： 本发明公开了一种研究卵母细胞体外成熟中卵丘细胞基因功能的方法，包括如下步骤：成熟碟的制备：取20.83uL成熟液于200uL离心管中，再加入1uL慢病毒，吹打混匀；将混匀后的成熟液在培养皿中做培养滴，并加入3mL矿物油，将培养皿放在培养箱平衡3‑5h；慢病毒转染COCs：从卵泡中的挑选出COCs，再用成熟液IVM将COCs清洗三遍；把清洗好的COCs转染30‑50h，本发明的慢病毒转染卵丘‑卵母细胞复合物来发明卵母细胞成熟中卵丘基因功能的方法，通过慢病毒转染实现干扰卵丘细胞中目的基因或蛋白的表达，有效地解决卵丘细胞不能进行显微注射的问题，又能很好地发挥卵丘基因在卵母细胞成熟过程中发挥的作用。

摘要： 本发明公开了一种人卵丘细胞饲养层培养干细胞的方法，包括下述步骤：①采用体外受精胚胎移植技术治疗不孕症的患者治疗过程中废弃的卵丘细胞，采用离心机离心；②将离心后的上清液弃掉得到卵丘细胞悬液，再加卵丘细胞的培养基混匀置入离心机内离心，离心后的沉淀物加入卵丘细胞培养基得到卵丘细胞悬液；取四孔皿，每孔中加入明胶，在室温中放置后将明胶液体全部吸出后备用；在四孔皿中加一定密度的卵丘细胞悬液后放置在CO

摘要： 本实用新型公开了一种用于快速拣出卵母细胞-卵丘细胞复合体的培养皿，它包含下培养皿(1)和兼作下培养皿(1)上盖的上培养皿(2)；所述下培养皿(1)的平面为正方形结构，其下侧板(3)与下底板(4)的结合处设置有下斜边(5)；所述的上培养皿(2)平面为正方形结构，其上侧板(6)与上底板(7)的结合处设置有上斜边(8)；所述的下底板(4)与上底板(7)的边长一致，所述的下斜边(5)的长度略小于上斜边(8)的长度。本实用新型结构简单，收纳方便，由于下底板和上底板的内侧均蚀刻有方格和箭头，大大的方便了分拣工作。