环磷酰胺致小鼠免疫器官损伤的组织学研究

摘要

[目的]本研究旨在探索建立环磷酰胺免疫抑制小鼠模型的最佳注射剂量。[方法]选取32只5周龄雌性小鼠,随机分为4组,预饲7 d后,对照组小鼠腹腔注射0.5 mL生理盐水,CTXⅠ组、CTXⅡ组、CTXⅢ组分别腹腔注射40、100、160 mg·kg^(-1)·BW^(-1)的CTX溶液,注射后第7天测定小鼠胸腺、脾脏指数及体重变化,制备石蜡组织切片、透射电镜切片、血涂片及骨髓涂片,观察胸腺、脾脏、骨髓组织损伤程度,计数中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞比例及骨髓多染红细胞(PCE)微核率。[结果]与对照组相比,CTX可导致小鼠体重和胸腺指数显著下降(P<0.05),小鼠体重分别为(28.71±2.02)g、(28.09±2.54)g、(28.08±2.22)g,胸腺指数分别为2.44±0.34、1.92±0.26、1.64±0.31。胸腺结构紊乱,纤维增生,胸腺细胞大量凋亡和死亡。脾脏结构模糊,脾脏动脉周围淋巴鞘变薄,发生髓外造血,各类免疫细胞凋亡和坏死显著增多。与对照组相比,CTX导致小鼠血液中中性粒细胞比例显著升高(P<0.05),分别为52.21%±4.08%、52.00%±7.40%、70.90%±1.92%;小鼠淋巴细胞比例显著下降(P<0.05),分别为44.00%±2.93%、41.67%±6.33%、24.38%±4.31%;白细胞形态发生变异,濒死及死亡白细胞数量增多;小鼠骨髓PCE微核率显著升高(P<0.05),分别为4.38‰±2.83‰、13.75‰±1.91‰、18.25‰±1.98‰,股骨骨髓内髓性造血干细胞显著减少并伴有纤维增生。[结论]CTX浓度在100 mg·kg^(-1)·BW^(-1)时可引起昆明小鼠胸腺、脾脏、骨髓及白细胞出现典型的病理损伤,可用于制备免疫抑制小鼠模型。研究结果为筛选适宜的制备免疫抑制小鼠模型的CTX注射浓度提供了组织学上的参比依据。