HPLC测定大豆皂苷方法的建立和优化

摘要

为了实现大豆皂苷的快速分离及含量测定,采用高效液相色谱法(HPLC)对4种大豆皂苷(Aa、Ab、Ba、Bb)进行分析检测,建立并优化采用高效液相色谱法(二极管阵列检测器)测定4种大豆皂苷的条件,并采用外标法进行定量分析.结果表明,采用HPLC法测定大豆皂苷的最优条件为:色谱柱ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30°C,流动相A为0.05％的乙酸乙腈溶液,流动相B为0.05％的乙酸水溶液,进样30μL,流速1.0 mL/min,检测波长205 nm.大豆皂苷在100～1000μg/mL范围内线性关系良好,4种大豆皂苷线性相关系数均不低于0.997,大豆皂苷Aa、Ab的检测下限为20μg/mL,Ba、Bb的检测下限为10μg/mL;加标检出率为89.9％～105.6％,相对标准偏差为1.06％～2.31％.该方法操作简单、准确度高、重现性好,可用于大豆种子中4种大豆皂苷的定性定量检测.