血管紧张素Ⅱ对大鼠HSCs分泌ECM影响机制的研究

摘要

目的探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）刺激大鼠肝脏星状细胞（HSCs）分泌细胞外基质（ECM）的可能机制。方法采用胶原酶原位循环灌流法分离大鼠肝星状细胞（HSCs）。①用不同浓度AngⅡ（10^-9～10^-5 mol／L）处理HSCs，酶联免疫吸附法检测各组HSCs层黏蛋白（LN）、透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PcⅢ）和Ⅳ型胶原（CⅣ）水平。以未经AngⅡ处理的HSCs作为对照组。②选择使ECM分泌显著增加的AngⅡ处理组HSCs，抽提RNA后采用RT-PCR技术测定转化生长因子-β1（TGF—β1）和结缔组织生长因子（CTGF）mRNA表达，并与新鲜分离的大鼠HSCs和对照组HSCs进行比较。结果与对照组比较，AngⅡ各浓度处理组HSCs的LN和HA分泌水平均明显增加（P〈0．01），且呈剂量依赖关系；AngⅡ10^-7～10^-5 mol／L处理组HSCs的PcⅢ和CⅣ分泌水平也显著增加（P〈0．01）。RT—PCR检测结果显示，与新鲜分离大鼠和对照组HSCs比较，有较高ECM分泌水平的10μmol／L AngⅡ处理组HSCs的TGF—β1和CTGF mRNA表达水平明显升高。结论AngⅡ能刺激大鼠HSCs分泌ECM，其通过促进TGF—β1表达经CTGF介导而参与肝脏纤维化的发生。