二甲双胍对TNF-α诱导的血管平滑肌细胞增殖及炎症反应的影响

摘要

目的探讨二甲双胍对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及炎症反应的影响及可能机制。方法以不同浓度TNF-α和二甲双胍处理VSMCs 24 h,MTT比色法筛选最适处理浓度,在此基础上将细胞分为对照组、TNF-α组、TNF-α+二甲双胍组和二甲双胍组,采用流式细胞术检测细胞周期,RT-PCR、Western blotting检测环氧化酶-2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,Westeim blotting检测AMPK以及磷酸化AMPK(p-AMPK)的表达。结果 10 ng/mL TNF-α处理组的吸光度值显著增高(P<0.01),加入2 mmol/L二甲双胍孵育后的吸光度值变化最为明显(P<0.05)。在二甲双胍+TNF-α组,G_1期细胞比率明显低于对照组而高于TNF-α组;细胞iNOS和Cox-2的表达减少,p-MAPK表达增加。结论二甲双胍可能通过AMPK途径阻滞细胞周期,抑制TNF-α诱导的VSMCs增殖及炎症反应。