转化生长因子β_1对结核性胸膜炎患者间皮细胞上皮-间质转化的影响及机制

摘要

目的·探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)对结核性胸膜炎患者间皮细胞上皮-间质转化(EMT)的影响及机制。方法·选取结核性胸膜炎患者35例,行胸腔镜检查,留取胸腔积液,分离纯化胸膜间皮细胞(PMC),对PMC进行培养并分为4组:空白对照组(仅含细胞培养液)、TGF-β_1处理组(加入5μg/L人重组TGF-β_1处理)、PD150606处理组(加入20 mg/L PD150606处理)、联合组(加入5μg/L人重组TGF-β_1和2 mg/L PD150606处理)。培养48 h后,实时荧光定量PCR检测不同处理组细胞calpain-1、CK8、E-cadherin、vimentin和α-SMA基因表达,Western blotting法检测不同处理组细胞中calpain-1、CK8、E-cadherin、vimentin和α-SMA蛋白表达。结果·与空白对照组相比,TGF-β_1处理组能促使PMC发生EMT,出现间质细胞典型特征,加入calpain抑制剂PD150606可阻断TGF-β_1诱导的PMC上皮-间质转化。与空白对照组相比,TGF-β_1处理组calpain-1基因和蛋白表达量均升高,CK8和E-cadherin基因和蛋白表达量均下降,而vimentin和α-SMA基因和蛋白表达量均上升。加入PD150606后,与TGF-β_1处理组相比,联合组calpain-1基因和蛋白表达量均下降,CK8和E-cadherin基因和蛋白表达量均上升,而vimentin和α-SMA基因和蛋白表达量下降;而与空白对照组相比,联合组calpain-1、CK8、E-cadherin、vimentin和α-SMA基因和蛋白表达量均无差异;PD150606处理组与空白对照组相比均无显著差异。结论·TGF-β_1可能通过上调calpain-1而诱导结核性胸膜炎患者PMC发生EMT。