套式PCR方法在泰泽氏菌检测中的应用和验证

摘要

用泰泽氏菌RJ株感染的大鼠肝组织匀浆腹腔注射Scid小鼠和BALB/c小鼠,提取注射后小鼠肝、肾、肺、脾的DNA,PCR扩增,核酸杂交。根据泰泽氏菌的保守序列合成引物扩增泰泽氏菌的基因组DNA,建立了泰泽氏菌的套式PCR方法,并将此方法应用于Scid小鼠和BALB/c小鼠以及可疑样品的检测,其中Scid小鼠的肝、肾组织和BALB/c小鼠的肝组织及可疑组织得到特异性扩增带,其他动物样品和组织DNA均为阴性结果。进一步对该DNA片段进行核酸杂交,结果证实,凡PCR套式扩增为阳性的,均有杂交带。因此,泰泽氏菌套式PCR方法在实际检测中是切实可行,其具有敏感性和特异性高的优点。