蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因的克隆与其在乳酸菌中的表达

摘要

全球每年可产生的纤维素数量庞大。为了探索纤维素资源,更为科学合理的利用纤维素类饲料提供理论依据,根据蜡样芽胞杆菌纤维素酶基因序列设计1对特异性引物,扩增纤维素酶(Cell)基因,获得片段大小约为1 269bp的目的基因。该基因与Bacillus cereus B4264、Bacillus cereus G9842纤维素酶基因序列同源性分别达96%和95%。将Cell基因与乳酸乳球菌表达载体pNZ8149进行连接,电转化入乳酸菌NZ3900中,构建纤维素高效分解基因工程乳酸菌,经乳链菌肽(Nisin)诱导表达,SDS-PAGE分析得到分子量大小约为42kDa的目的片段。刚果红平板验证该表达蛋白具有纤维分解活性。FPA法测定表达产物酶活力为0.57U/mL。该基因的成功表达,对纤维素基因工程菌的相关研究具有指导意义。