PRPS2在不同生精功能障碍睾丸组织中的表达以及对生精细胞凋亡和增殖的影响

摘要

目的 探讨磷酸核糖焦磷酸合成酶2 (RRPS2)在生精功能不同的睾丸组织中的表达情况以及可能的生物学机制. 方法 收集2015年7至2017年6月期间在我院病理科存档的石蜡包埋睾丸组织标本63例,其中45例标本来自无精子症或严重少精子症患者,18例组织标本取自生精功能正常者,采用免疫组化法检测生精功能不同的睾丸组织中PRPS2表达情况.采用流式细胞术和MTT方法分析PRPS2基因沉默或过表达对GC1精原细胞、GC2精母细胞和TM4支持细胞凋亡和增殖活性的影响.采用qRT-PCR和Western blot法检测PRPS2对E2F1转录因子表达的影响. 结果 重度生精功能不良的睾丸组织(35.71％)以及唯支持细胞综合征睾丸组织(21.43％)中PRPS2高表达,显著低于生精功能正常的睾丸组织(72.22％)(P＜0.05);GC1细胞株中PRPS2表达量显著高于GC2和TM4细胞株(P＜0.05);shPRPS2基因沉默后,GC1细胞、GC2细胞和TM4细胞凋亡率较空白对照组显著增加,而增殖活性显著降低(P＜0.05).PRPS2基因表达上调后,细胞凋亡率较空白对照组和shPRPS2细胞组显著降低,增殖活性显著升高(P＜0.05);shPRPS2基因沉默后,E2F1 mRNA和蛋白表达量较空白对照组显著降低(P＜0.05).而PRPS2基因表达上调后,E2F1 mRNA和蛋白表达量较空白对照组和shPRPS2细胞组显著上调(P＜0.05). 结论 PRPS2参与生精细胞凋亡和增殖过程,其可能的作用机制与下调E2F1转录因子的表达有关.