不同提取方法对人脂肪间充质干细胞生物学活性影响

摘要

cqvip:目的探讨使用不同方法分离提取的脂肪间充质干细胞(ADMSCs)是否存在细胞生物学活性的差异。方法分别使用直接消化法和干细胞基质胶消化法分离提取ADMSCs,进行细胞表型鉴定、增殖活性检测,应用Real-time PCR方法检测诱导分化后成脂标志基因过氧化物酶体激活受体γ(PPAR-γ)和成骨标志基因runt转录因子2(RUNX-2)mRNA的表达,Western blot方法检测PPAR-γ和RUNX-2蛋白表达。结果基质胶消化法得到的ADMSCs相较于直接消化法得到的ADMSCs在培养第3天的增殖活力更高(F=727.139,P<0.05)。与直接消化法比较,成脂诱导分化6~12 d后基质胶消化法得到ADMSCs的PPAR-γmRNA表达增高(F=40.260~157.532,P<0.05),PPAR-γ蛋白表达在诱导分化6 d后增高(F=1501.475,P<0.05);成骨诱导分化3~12 d基质胶消化法得到ADMSCs的RUNX-2 mRNA表达较直接消化法增高,诱导分化3 d蛋白表达增高(F=58.018~2402.049,P<0.05)。结论使用基质胶消化法得到的ADMSCs成脂、成骨分化潜力优于直接消化法。