牙鲆外周血淋巴细胞的培养及染色体制备条件的探讨

摘要

以牙鲆为试验材料研究探讨其外周血淋巴细胞培养及染色体制备的条件方法.用RPMI 1640全血培养基进行培养,从培养温度、培养时间、刺激源PHA和ConA、秋水仙素处理时刻及处理浓度、低渗处理时间等方面对外周血淋巴细胞的培养及其染色体制备条件进行探讨,建立较成熟的牙鲆外周血淋巴细胞培养及染色体制备的方法.结果表明:3.5ml培养基中加入0.2ml全血,21℃下用终浓度为0.1mg/ml的ConA为刺激源培养48h,在结束培养前4h加入终浓度1.5μg/ml秋水仙素,低渗25min可获得较好的染色体分裂相.