G145R变异重组HBsAg ELISA检测质控参照品制备的初步研究

摘要

目的:实验性制备G145R变异重组乙型肝炎表面抗原(rHBsAg)质控参照品.方法:收集含G145R变异rHBsAg的细胞培养上清,采用50%饱和硫酸铵盐析,根据其在D12-ELISA中的检测信号,以卫生部颁布的HBsAg ELISA质控血清精确标定盐析物中靶物质的含量,适量稀释分装,置-20℃冻存.采用不同方法对制备物的特异性与稳定性进行考核,并将其试用于对几种市售试剂盒检测变异能力的评价.结果:制备物中靶物质含量在0.50～32.00 ng/mL wcHBsAg之间,在D12-ELISA检测中其信号的线性关系与质控血清有很好的一致性;反复冻融对其稳定性无显著影响;采用不同市售ELISA试剂检测时其反应信号强度各不相同.结论:本研究制备的G145R变异rHBsAg ELISA质控参照品具有较高的稳定性、特异性与实用性;其研制为乙肝病毒免疫逃逸现象在基础、临床、诊断试剂研发,以及流行病学调查等方面研究的开展提供了重要的物质基础.