p65通过调控脂代谢影响HepG2细胞增殖研究

摘要

目的p65作为NF-κB家族重要的转录因子,在肝细胞癌进展过程中发挥着重要作用。本研究旨在探索p65对HepG2细胞脂代谢调控的影响。方法应用数据库分析p65表达与HCC患者预后的关系。采用ChIP-seq和RNA-seq技术,采用生物信息学分析探究HepG2细胞p65 DNA结合谱,使用流式细胞术检测p65对HepG2细胞增殖的影响。采用实时定量PCR法(qRT-PCR)和免疫印记(Western blot,WB)法验证p65对脂代谢途径关键基因及其蛋白表达的影响,采用流式细胞术和共聚焦显微镜检测p65对HepG2细胞脂代谢的影响。结果对UCSC Xena和GEPIA数据库分析显示,HCC癌组织p65常呈高表达,并与不良预后相关;与对照组比,敲低p65抑制HepG2细胞增殖,而过表达p65则促进HepG2细胞增殖;对ChIP-seq和RNA-seq数据综合分析共得到了205个共同基因,且富集在代谢途径中的基因最多,其中脂代谢相关关键基因包括ACSM2A、ACSM2B、ACSM3、ACSM5和HMGCS2等;p65敲低后ACSM5和HMGCS2 mRNA及其蛋白表达均显著降低,而p65过表达后ACSM5和HMGCS2 mRNA及其蛋白表达均显著升高;p65敲低能促进HepG2细胞脂质积累,而p65过表达则抑制HepG2细胞脂质的积累。结论p65通过上调ACSM5和HMGCS2表达调控脂质代谢,促进HepG2细胞增殖。这一发现为揭示p65调控肝细胞癌细胞脂质代谢的机制提供了研究线索。