利用多重荧光定量PCR检测阿胶原料驴、马、驴骡和马骡皮张的源性

摘要

目的建立快速检测阿胶原料皮张源性的方法。方法根据马、驴、驴骡和马骡的核基因肌酸激酶CKM和线粒体基因组DNA（mtDNA）的16S rRNA基因序列设计特异，并引入18S rDNA作为内参质控，建立能检测4种动物源性的5重多色荧光定量PCR检测体系。结果本研究开发的引物和分子信标探针的特异性强，能同时区分同源性相近的驴、马、驴骡和马骡源性；灵敏度高，检测限为0．01ng·μL-1。通过对某阿胶制品公司收购的驴皮源性检测，检测结果与DNA测序一致率达100％。结论本方法在一管PCR反应中能同时检测4种动物源性，更简单、准确和高效，为驴皮、马皮及骡子皮张的源性鉴定探索了新的途径。