用短膜虫酶联免疫吸附试验(CL-ELISA)检测抗天然脱氧核糖核酸抗体(AnDA)的实验报告

摘要

鉴于检测血中AnDA对系统性红斑狼疮（SLE）等有重要临床意义,常规放免法及免疫荧光法还未能普遍应用,而ELISA方法相对简便,所以本文对用CL-ELISA检测AnDA的效果进行了研究。 CL-ELISA:短膜虫底片由生研所提供。待检血清用PBS（0.01 M pH 7.6）1/5稀释,取20μl滴在虫斑上,经孵育、PBS洗泡、甩干,滴加0.0125mg（Ab）/12.5 ml的辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗人IgG抗体（E/Ab=1,生研所1984.1批,最佳工作稀释度经方阵试验选择）20μl,再孵育洗泡甩干,滴加0.1ml含0.003％HO2的Karnovsky液染色7～8分钟,用Tris-HCI缓冲液（0.05 M,pH 7.6）