骨巨细胞瘤中多核巨细胞的纯化及其性质的探讨

摘要

目的:利用酶消化方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞进行纯化,以弥补破骨细胞获取量少的问题,为骨质疏松的体外研究提供丰富的细胞来源.并用免疫组化的方法对骨巨细胞瘤中多核巨细胞的性质和来源进行探讨.方法:体外分离培养8例骨巨细胞瘤的多核巨细胞,在培养20 h后,用0.5 g*L-1胰蛋白酶/0.2 g*L-1 EDTA联合消化的方法去除贴壁能力较弱的单核基质细胞.将分离培养的骨巨细胞瘤多核巨细胞与牙磨片共培养,观察骨巨细胞中多核巨细胞的噬骨能力.并用破骨细胞特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶-9对多核巨细胞进行免疫组化染色和TRAP染色.结果:利用酶联合消化的方法可以获得较高纯度的多核巨细胞,纯化率达85%.骨巨细胞瘤中的多核巨细胞对破骨细胞所特异表达的空泡型质子泵、Ⅱ型碳酸酐酶、组织蛋白酶K、基质金属蛋白酶-9呈强阳性表达,TRAP染色阳性,体外培养具有噬骨能力.结论:利用0.5 g*L-1胰蛋白酶/0.2 g*L-1 EDTA消化的方法可获得较高纯度的多核巨细胞,可为破骨细胞体外研究提供丰富的细胞来源.骨巨细胞瘤中的多核巨细胞在功能表达上与破骨细胞相似,它可能来源于病变中圆形单核基质细胞的融合.