用MAPs制备新肿瘤相关基因1 A6/DRIM的多克隆抗体

摘要

目的 :获得 1A6 /DRIM的N端特异性抗体并对其在细胞内的定位进行分析。方法 :针对 1A6 /DRIM的N端多肽用多通道同步固相全自动合成系统合成 ,以无免疫原性的赖氨酸结构为核心偶联 ,将此多聚抗原肽 (mutipleantigenicpeptides,MAPs)免疫新西兰大白兔 ,从免疫兔血清中获得 1A6 /DRIM的多克隆抗体。结果 :用WesternBlot技术证明了 1A6 /DRIM的N端抗体 ,与C端特异性单克隆抗体识别相同的 1A6 /DRIM基因表达的 31 0 0 0 0蛋白条带 ,经过WesternBlot和免疫荧光的方法初步证实 1A6 /DRIM在多种胃癌细胞系、乳腺癌细胞系以及肝癌细胞系中表达 ,免疫荧光显示 1A6 /DRIM主要定位在细胞核内。结论 :对于用谷胱苷肽巯基转移酶 (Glutathion S transferase ,GST)融合蛋白方法不能诱导表达的蛋白 ,可利用合成MAPs制备抗原的方法获得抗体。本研究用此方法制备的抗体特异性识别 1A6