单细胞克隆小鼠胚胎干细胞系的建立

摘要

目的 :建立胚胎干细胞的培养系统及培养方法。方法 :用免疫溶解法 (immunosurgery)分离 3.5d的 1 2 9SvJ系小鼠囊胚内细胞团 ,在γ射线照射的胎鼠成纤维细胞饲养层上培养 ,胰酶消化传代。用组织化学法、免疫组织化学方法识别细胞表面标志 ,常规G带法行染色体核型分析 ,在体、离体分别观察细胞的多向分化能力。结果 :得到一个单细胞克隆 1 2 9系小鼠胚胎干细胞系G1 1 ,能长期稳定增殖不分化 ,具有正常 4 0XY核型 ,碱性磷酸酶阳性、SSEA 1阳性 ,在体和离体条件下可分化为多种细胞。结论