具生殖系嵌合能力的C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系的建立

摘要

目的:建立能实现种系传递的C57BL/6J 小鼠胚胎干细胞系.方法:从C57BL/6J 小鼠3.5 d的囊胚中分离培养内细胞团.经体外适宜培养建系后,将C57BL/6J胚胎干细胞(ES)注入ICR小鼠受体囊胚腔,制备嵌合体小鼠.结果:成功地建立了3个C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系,该C57BL/6J ES细胞呈集落状生长,正常稳定的核型率＞80%,具高水平的磷酸酶活性,并表达ES细胞特殊性细胞表面标记SSEA-1,不表达SSEA-3和SSEA-4;体内外的分化实验也证实mC57ES1具向三胚层组织分化的能力.经显微注入ICR小鼠囊胚腔中,产生4只嵌合体小鼠,经证实其中1只为种系嵌合小鼠.结论:建立了能实现种系传递的C57BL/6J小鼠胚胎干细胞系,该系的ES细胞可用于今后制备转基因动物和基因敲除动物.