黄河蜜甜瓜1-氨基环丙烷1-羧酸合成酶基因片段的克隆和反义载体的构建

摘要

从伤诱导的黄河蜜甜瓜(Cucumis melo cv.Huanghemi)成熟果实的中果皮组织中分离总RNA,经反转录和PCR扩增得到974 bp的cDNA片段,克隆到质粒载体pGEM-3zf,经测序与Genbank中甜瓜1-氨基环丙烷1-羧酸合成酶(1-amino-cyclopropane-1-carboxylie acid synthase,ACS)基因同源性为99%.克隆片段经双酶切消化,反向插入到植物表达载体pBI121的35S启动子和NOS终止子之间,构建成ACS基因的反义表达载体.